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本发明涉及生物工程领域,公开了一种磷脂酰丝氨酸的纯化方法,包括:步骤1:通过磷脂酶的酶解反应获得磷脂酰丝氨酸粗品;步骤2:对磷脂酰丝氨酸粗品多次醇洗,其中采用调节浓度和pH值后的乙醇进行醇洗;步骤3:对醇洗后的磷脂酰丝氨酸粗品进行干燥,直至到达磷脂酰丝氨酸产品的质量参数。本发明提供一种磷脂酰丝氨酸的纯化方法,利用不同浓度和不同pH值的乙醇纯化磷脂酰丝氨酸,获得纯度大于50%的磷脂酰丝氨酸,制备方法简单,实验条件温和,生产成本低,有利用规模化生产和推广。