一种分离羊毛甾醇和二氢羊毛甾醇的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114213496A(43)申请公布日2022.03.22(21)申请号202111411776.9(22)申请日2021.11.25(71)申请人浙江花园生物高科股份有限公司地址322121浙江省金华市东阳市南马镇花园村申请人杭州下沙生物科技有限公司(72)发明人单伟达卢艳蓉郭阳钱国平刘建刚(74)专利代理机构浙江千克知识产权代理有限公司33246代理人赵芳(51)Int.Cl.C07J9/00(2006.01)权利要求书1页说明书4页(54)发明名称一种分离羊毛甾醇和二氢羊毛甾醇的方法(57)摘要一种分离羊毛甾醇和二氢羊毛甾醇的方法。该包括如下步骤：将羊毛甾醇和二氢羊毛甾醇混合物粗品溶解于溶剂中配制成原料液；在所述原料液中添加络合剂进行络合反应，反应结束后冷却结晶分离，得到络合物结晶和络合母液；所述络合物结晶进行解络得到络合物粗品，再经过重结晶得到羊毛甾醇纯品；所述络合母液经过重结晶得到二氢羊毛甾醇纯品。本发明通过络合结晶法能够有效的实现羊毛甾醇和二氢羊毛甾醇的分离，就有分离纯度高、收率高、工艺简单、成本低以及绿色环保等优点。CN114213496ACN114213496A权利要求书1/1页1.一种分离羊毛甾醇和二氢羊毛甾醇的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将羊毛甾醇和二氢羊毛甾醇混合物粗品溶解于溶剂中配制成原料液；(2)在所述原料液中添加络合剂进行络合反应，反应结束后冷却结晶分离，得到络合物结晶和络合母液；(3)所述络合物结晶进行解络得到络合物粗品，再经过重结晶得到羊毛甾醇纯品；(4)所述络合母液经过重结晶得到二氢羊毛甾醇纯品。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中的溶剂为非质子溶剂或质子溶剂；所述非质子溶剂为石油醚、己烷、辛烷、乙酸乙酯中的一种或其混合物；所述质子溶剂为水、甲醇、乙醇中的一种或者其混合物。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中的络合剂选自有机酸、卤酸、卤盐其中一种。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述络合剂选自草酸、琥珀酸、苹果酸、卤酸、尿素、氯化锌、氯化钙、溴化钙、氯化镁、溴化镁、氯化亚铁中的一种或者其混合物。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述溶剂、混合物粗品及络合剂的质量比为：(1‑4)：(1‑4)：(0.05‑2)。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中的络合反应的反应温度为40‑80℃，搅拌速度为300‑400r/min，络合时长为0.5‑1h。7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)冷却结晶分离具体是：在10℃下进行冷却结晶，然后经减压抽滤分离，得到络合物结晶。8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)中的络合物结晶通过水和有机物的混合溶剂进行解络；所述有机物选自甲醇、乙酸乙酯、二烷基酮、石油醚中的一种或者其混合物。9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，络合结晶物、水及有机物的质量占比为：1：(0.5‑2)：(0.5‑2)。10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)的解络过程具体是：将络合物结晶与水和有机物的混合溶剂混合后升温至40‑60℃，在300‑400r/min条件下搅拌30‑40min，然后静置分层，将有机物层分出并旋转蒸干，得到络合物粗品。2CN114213496A说明书1/4页一种分离羊毛甾醇和二氢羊毛甾醇的方法技术领域[0001]本发明属于天然有机物提纯技术领域，具体涉及一种分离羊毛甾醇和二氢羊毛甾醇的方法。背景技术[0002]羊毛甾醇化学名为(3β)‑8,24‑羊毛甾二烯‑3‑醇，白色结晶，属于四环三萜类化合物，分子式为C39H50O，分子量426，熔点140‑141℃，溶于氯仿、乙醇和乙醚。羊毛甾醇具有多种重要的生物活性和广泛的药理作用，可以作为胆甾醇生物合成和固醇类激素合成过程的重要中间体，是麦角甾醇及多种具有抗癌、降血脂血糖、治疗白血病等生物活性的三萜类化合物的重要前体(Nat.Prod.Rep.,15,653‑696,1998)，此外，还可以用作化妆品原料。早期有文献报道了羊毛甾醇对结肠癌具有化学预防作用的初步研究(CancerDetectionandPrevention,26(6):419‑425,2006)。因此，分离高纯度的羊毛甾醇具备较高的研究价值。[0003]在羊毛脂的不皂化物中，羊毛甾醇(A)和二氢羊毛甾醇(B)约以等量存在。二者的分子结构非常相似，如式A和式B所示，两者只在24位相差一个双键，制备羊毛甾醇纯品的关键难点在于羊毛甾醇和二氢羊毛甾醇的分离。[0004][0005]目前用于生产和科研的羊毛甾醇制备方法有结晶法、皂化法、分子蒸馏法、超临