一种发酵提取茶氨酸的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114410504A(43)申请公布日2022.04.29(21)申请号202111532806.1C12R1/19(2006.01)(22)申请日2021.12.15(83)生物保藏信息CGMCCNo.235832021.10.12(71)申请人新疆阜丰生物科技有限公司地址830026新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市经济技术开发区（头屯河区）甘泉堡工业区(72)发明人冯世红王飞刘福玲张宗华郭晓东张绍森王利君(51)Int.Cl.C12N1/20(2006.01)C12P13/04(2006.01)C07C231/24(2006.01)C07C237/06(2006.01)权利要求书1页说明书4页(54)发明名称一种发酵提取茶氨酸的方法(57)摘要本发明属于茶氨酸生产领域，公开了一种发酵提取茶氨酸的方法，其是将茶氨酸发酵液进行陶瓷膜过滤，脱色分离，之后经过蒸发器浓缩结晶、离心烘干得到茶氨酸成品。本发明的茶氨酸的发酵提取方法显著提高了茶氨酸的产率和收率，提高产品质量。CN114410504ACN114410504A权利要求书1/1页1.一种发酵提取茶氨酸的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：步骤1）生物发酵，步骤2）陶瓷膜过滤，步骤3）一次脱色，步骤4）脱色膜脱色，步骤5）浓缩蒸发，步骤6）二次脱色，步骤7）结晶和烘干。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：步骤1）生物发酵：将大肠埃希氏菌(Escherichiacoli)CTh2020‑05种子液按照10‑15%的接种量接入到含有发酵培养基的发酵罐中发酵24h，收集茶氨酸发酵液；步骤2）陶瓷膜过滤：将茶氨酸发酵液经过陶瓷膜过滤，收集陶瓷膜清液；步骤3）一次脱色：将陶瓷膜清液打入脱色罐，加入活性炭进行脱色处理，脱色时间50min，脱色温度70℃；步骤4）脱色膜脱色：将步骤3）脱色完成的清液在脱色膜中进行脱色处理，得到脱色清液；步骤5）浓缩蒸发：将步骤4）得到的脱色清液输送到四效蒸发器进行蒸发浓缩结晶，离心收集粗晶体；步骤6）二次脱色：将步骤5）得到的粗晶体溶于水，打入脱色罐，加入活性炭进行二次脱色处理，脱色时间50min，脱色温度70℃；步骤7）结晶和烘干：将步骤6）得到的脱色清液输送到二效蒸发器进行蒸发结晶，离心收集晶体，烘干。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述发酵培养基的组分为：葡萄糖60g/L，玉米浆20g/L，七水硫酸镁1g/L，磷酸二氢钾2g/L，磷酸氢二钾2g/L，七水硫酸亚铁50mg/L，一水硫酸镁40mg/L，硫酸锌10mg/L，六水硝酸钴5mg/L。4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述发酵条件为：转速550rpm，pH=7.0，压力0.05MPa，温度36‑40℃，溶氧控制为20%。5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述烘干采用流化床烘干，控制烘干温度80℃，烘干时间15min。2CN114410504A说明书1/4页一种发酵提取茶氨酸的方法[0001]技术领域[0002]本发明属于生物发酵行业茶氨酸生产领域，具体提供一种发酵提取茶氨酸的方法。背景技术[0003]茶氨酸是茶树中特有的化学成分之一，又名N‑乙基‑Y‑谷氨酰胺，非蛋白氨基酸。自然界存在的茶氨酸均为L型，纯品为白色针状结晶，极易溶于水，而不溶于无水乙醇和无水乙醚，水溶液呈微酸性，性质稳定，有焦糖香及类似味精的鲜爽味，毒性实验中未发现其有毒性。[0004]茶氨酸影响脑中多巴胺等的代谢和释放，相关的脑部的疾病也有可能得到调节或预防。茶氨酸还可通过神经传达物质来改善学习能力和记忆力。茶叶的减肥作用是茶叶中包括茶氨酸在内的多种成分共同作用的结果。茶氨酸尤其对减少体内胆固醇有效。近年来，随着茶氨酸生理功能和医药价值的发现，茶氨酸在医疗、保健、食品、饮料和精细化工等领域被广泛利用。[0005]目前，茶氨酸的生产方法主要有4种：1）茶叶提取法：主要从茶叶中直接提取、分离纯化茶氨酸，提取步骤繁杂，设备种类多，存在提取成本高的问题。2）化学合成法：该法可能残留毒性物质，且生成物包括D、L‑型茶氨酸异构体，需要进行拆分才能得到L型产品，使得分离精制操作复杂。3）组织培育法：茶树愈伤组织有合成茶氨酸的能力，组织中茶氨酸的积累与生长同步。改善培育方法，如增加蔗糖浓度、减少光照、添加乙胺、使用生长激素等提高茶氨酸的积累。此法目前运行成本过高，无法产业化。4）发酵法：是指利用微生物酶法进行生产，以谷氨酰转肽酶的菌株发酵产生相应的酶后，再与L‑谷氨酰胺、盐酸乙胺反应从而制备茶氨酸。[0006]比如，中国专利CN102850235A公开了L‑茶氨酸的纯化工艺，该方法以谷氨酰转肽酶的菌株发酵液为起始原料，