一种利用高速逆流色谱分离纯化对甲氧基肉桂酸乙酯和/或肉桂酸乙酯的方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115260032A(43)申请公布日2022.11.01(21)申请号202211219023.2(22)申请日2022.10.08(71)申请人中国科学院昆明植物研究所地址650201云南省昆明市蓝黑路132号(72)发明人董泽军肖雪蓉张凌鞠鹏瞿燕(74)专利代理机构北京高沃律师事务所11569专利代理师申素霞(51)Int.Cl.C07C67/56(2006.01)C07C69/734(2006.01)C07C69/618(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图10页(54)发明名称一种利用高速逆流色谱分离纯化对甲氧基肉桂酸乙酯和/或肉桂酸乙酯的方法(57)摘要本发明提供了一种利用高速逆流色谱分离纯化对甲氧基肉桂酸乙酯和/或肉桂酸乙酯的方法，属于天然产物技术领域。本发明采用高速逆流色谱分离法，以正己烷‑乙酸乙酯‑甲醇‑水体系作为两相溶剂体系，能够高效制备得到山奈提取物，山奈提取物的分离量大、无损耗、收率高、纯度高；而且，本发明提供的提取方法，具有操作简便、重现性好和分离环境缓和的特点。进一步地，本发明通过控制正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水的体积比能够得到高纯度的对甲氧基肉桂酸乙酯和/或肉桂酸乙酯。CN115260032ACN115260032A权利要求书1/1页1.一种利用高速逆流色谱分离纯化对甲氧基肉桂酸乙酯和/或肉桂酸乙酯的方法，包括以下步骤：将山奈根茎与乙醇溶液混合，进行醇提，得到山奈粗提物；将所述山奈粗提物进行高速逆流色谱分离，得到对甲氧基肉桂酸乙酯和/或肉桂酸乙酯；所述高速逆流色谱分离采用的两相溶剂体系为正己烷‑乙酸乙酯‑甲醇‑水体系，所述两相溶剂体系的上相为固定相，下相为流动相。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述正己烷‑乙酸乙酯‑甲醇‑水体系中正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水的体积比为（3~4）：（1~1.5）：（3~4）：（1~1.5）。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述乙醇溶液中乙醇的体积分数为50~95%。4.根据权利要求1或3所述的方法，其特征在于，所述醇提的温度为50~80℃，醇提的次数为2~4次，单次醇提的时间为1~4h。5.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，正己烷‑乙酸乙酯‑甲醇‑水体系在使用前进行脱气处理。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高速逆流色谱分离条件包括：温度为0℃；主机的转速为5001000r/min；流动相的流速为520mL/min。20~3~~2CN115260032A说明书1/5页一种利用高速逆流色谱分离纯化对甲氧基肉桂酸乙酯和/或肉桂酸乙酯的方法技术领域[0001]本发明涉及天然产物技术领域，具体涉及一种利用高速逆流色谱分离纯化对甲氧基肉桂酸乙酯和/或肉桂酸乙酯的方法。背景技术[0002]山奈（kaempferiagalangaL.），又名沙姜、三藾、三奈、三柰、山辣、土麝香、万烘、香奈子，为姜科植物山柰属，分布于中国台湾、广东、广西、云南等省区。山柰具有良好的临床药理作用和药效，其根茎是一味常用的中药，其具有行气温中、消食、止痛的功效，临床主要用于治疗胸膈胀满、腹冷痛、饮食不消。山奈挥发油含量高，且气味芳香浓郁，还可以作为食品中的调料和香料广泛用于食品工业。目前研究表明山奈提取物的生物活性成分，具有较好的抗氧化、抗炎、抗癌、抗菌、抗病毒等多种功效。[0003]现有技术“利毛才让等.藏药山奈中对甲氧基肉桂酸乙酯提取工艺研究[J].安徽农业科学,2008,36(33):14585‑14586”对山奈药材中对甲氧基肉桂酸乙酯的提取工艺进行研究，首先采用索氏提取法、热回流法或超声法进行提取，然后进行高效液相色谱分离，得到对甲氧基肉桂酸乙酯。上述现有技术采用高效液相色谱分离过程中，对甲氧基肉桂酸乙酯进样量在0.1~0.8μg范围内呈良好的线性关系，对甲氧基肉桂酸乙酯的分离量小。发明内容[0004]有鉴于此，本发明的目的在于提供一种利用高速逆流色谱分离纯化对甲氧基肉桂酸乙酯和/或肉桂酸乙酯的方法，本发明提供的方法能够从山奈中高效、大批量地分离得到对甲氧基肉桂酸乙酯和/或肉桂酸乙酯。[0005]为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：本发明提供了正己烷‑乙酸乙酯‑甲醇‑水体系在高速逆流色谱制备山奈提取物中的应用。[0006]优选地，所述正己烷‑乙酸乙酯‑甲醇‑水体系中正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水的体积比为（3~4）：（1~1.5）：（3~4）：（1~1.5）。[0007]本发明提供了一种利用高速逆流色谱分离纯化对甲氧基肉桂酸乙酯和/或肉桂酸乙酯的方法，包括以下步骤：将山奈根茎与乙醇溶液混合，进行醇提，得到山奈粗提物；将所述山奈粗提物进行高速逆流色谱分离，得到对甲氧基肉桂酸乙酯和/