辣椒籽抑菌肽及其制备方法和应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115260280A(43)申请公布日2022.11.01(21)申请号202211191417.1(22)申请日2022.09.28(71)申请人中国农业大学地址100094北京市海淀区圆明园西路2号(72)发明人赵靓廖小军尹学东邓梓萌胡广芬王永涛饶雷吴华友姜凤皮飞飞杨利(74)专利代理机构北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙)11201专利代理师顾鲜红(51)Int.Cl.C07K1/14(2006.01)C07K1/34(2006.01)C12Q1/18(2006.01)C12R1/19(2006.01)权利要求书2页说明书4页(54)发明名称辣椒籽抑菌肽及其制备方法和应用(57)摘要本发明提出了辣椒籽抑菌肽及其制备方法和应用，制备方法包括：将辣椒籽进行粉碎、过筛和脱脂处理，得到辣椒籽粕；采用碱溶液对辣椒籽粕进行提取处理，得到提取物；将提取物进行离心处理，收集上清液；将上清液进行一级超滤处理，收集透过液；将透过液进行二级超滤处理，收集截留液，得到辣椒籽抑菌肽溶液；其中，一级超滤处理采用的滤膜截留分子量为8~15KD；二级超滤处理采用的滤膜截留分子量为3~7KD。利用本发明的制备辣椒籽抑菌肽的方法获得的辣椒籽抑菌肽具有抑菌效果，可以在短时间内高效抑菌，尤其适用于大肠杆菌，有助于提高辣椒籽的营养经济价值。并且，辣椒籽抑菌肽收率高、纯度好，制备方法操作简便，适于广泛应用。CN115260280ACN115260280A权利要求书1/2页1.一种制备辣椒籽抑菌肽的方法，其特征在于，包括：将辣椒籽进行粉碎、过筛和脱脂处理，得到辣椒籽粕；采用碱溶液对所述辣椒籽粕进行提取处理，得到提取物；将所述提取物进行离心处理，收集上清液；将所述上清液进行一级超滤处理，收集透过液；将所述透过液进行二级超滤处理，收集截留液，得到辣椒籽抑菌肽溶液；其中，所述一级超滤处理采用的滤膜截留分子量为8~15KD；所述二级超滤处理采用的滤膜截留分子量为3~7KD。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述过筛采用的是50~70目网筛；所述脱脂处理采用的脱脂溶剂选自正己烷、石油醚或无水乙醚；所述过筛处理所得辣椒籽粉与所述脱脂溶剂的质量体积比为1:8~1:12，单位为g/mL。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述提取处理包括：采用碱液对所述辣椒籽粕浸提至少一次；其中，所述碱液的pH值为9~11，所述辣椒籽粕与所述碱液的质量体积比为1:15~1:25，单位为g/mL，所述浸提的温度为2030℃，时间为140170min。~~4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述一级超滤处理是在温度为40~50℃、压力为0.2~0.6MPa的条件下进行3~5h；所述二级超滤处理是在温度为40~50℃、压力为0.2~0.6MPa的条件下进行0.5~1.5h。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法进一步包括：调节所述辣椒籽抑菌肽溶液的pH值至6.8~7.2，再进行冷冻干燥处理，得到辣椒籽抑菌肽粉。6.一种制备辣椒籽抑菌肽的方法，其特征在于，包括：1）预处理：将辣椒籽粉碎，过60目筛，将所得辣椒籽粉与正己烷混合，放置12h，搅动，将混合物进行抽滤处理，得到辣椒籽粕，所述辣椒籽粉和正己烷的质量体积比为1：10，单位为g/mL；2）碱溶：采用pH值为10.0的碱液对所述辣椒籽粕进行浸提处理1次，所述辣椒籽粕与碱液的质量体积比为1:20，单位为g/mL，所述浸提处理的温度为25℃、时间为150min，得到提取物；3）离心：将所述提取物在4℃、10000r/min的条件下离心20min，收集上清液；4）一级超滤：将所述上清液进行一级超滤处理，所述一级超滤处理条件如下：选用截留分子量为10kD的聚醚砜膜，在温度为45℃、操作压力为0.40Mpa的条件下对所述上清液进行超滤处理4h后，停止超滤，收集透过液；5）二级超滤：将所述透过液进行二级超滤处理，所述二级超滤处理条件为：选用截留分子量为5kD的聚醚砜膜，在温度为45℃、操作压力为0.40Mpa的条件下对所述透过液进行超滤处理1h后，停止超滤，收集截留液；6）中和：调节所述截留液的pH值为7.0；7）冷冻干燥：将所述中和所得截留液经过冷冻干燥，得到辣椒籽抑菌肽粉。7.一种辣椒籽抑菌肽，其特征在于，所述辣椒籽抑菌肽是通过权利要求1~5任一项所述制备辣椒籽抑菌肽的方法或权利要求6所述制备辣椒籽抑菌肽的方法获得的。2CN115260280A权利要求书2/2页8.权利要求7所述辣椒籽抑菌肽在抑菌中的应用。9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述菌选自大肠杆菌。10.一种抑菌方法，其特征在于，包括：将样品与权利要求7所述辣椒籽抑菌肽接触。11.根据权利要求1