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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110960567A(43)申请公布日2020.04.07(21)申请号201811153279.1A61K35/747(2015.01)(22)申请日2018.09.30(71)申请人天津中医药大学地址300193天津市南开区玉泉路88号(72)发明人赵鑫高秀梅王亚静刘二伟石惠姝(74)专利代理机构中国国际贸易促进委员会专利商标事务所11038代理人崔婧刘海罗(51)Int.Cl.A61K36/46(2006.01)A61P31/04(2006.01)A01N65/08(2009.01)A01N63/00(2020.01)A01P1/00(2006.01)权利要求书2页说明书9页(54)发明名称制备抑菌组合物的方法、制得的抑菌组合物及其应用(57)摘要本发明属于医药领域,具体涉及一种制备抑菌组合物的方法,包括如下步骤:(1)将保加利亚乳杆菌培养物与杜仲叶提取物混合,得到混合物;其中,所述混合物中的保加利亚乳杆菌活菌数为4.0×106~7.0×106CFU/mL或1.0×107~7.0×107CFU/mL,所述混合物中的杜仲叶生药浓度为1~9.6mg/mL;(2)将步骤(1)得到的混合物在20℃~38℃下培养20~30小时,得到抑菌组合物。本发明还涉及制得的抑菌组合物。本发明方法制备的抑菌组合物具有显著的抑菌效果。CN110960567ACN110960567A权利要求书1/2页1.一种制备抑菌组合物的方法,包括如下步骤:(1)将保加利亚乳杆菌培养物与杜仲叶提取物混合,得到混合物;其中,所述混合物中的保加利亚乳杆菌活菌数为4.0×106~7.0×106CFU/mL或1.0×107~7.0×107CFU/mL,所述混合物中的杜仲叶生药浓度为1~9.6mg/mL;(2)将步骤(1)得到的混合物在20℃~38℃下培养20~30小时,得到抑菌组合物。2.根据权利要求1所述的方法,其中,步骤(1)中,所述混合物中的保加利亚乳杆菌活菌数为4.0×106~6.0×106CFU/mL或1.0×107~6.2×107CFU/mL。3.根据权利要求1所述的方法,其中,步骤(1)中,所述混合物中的杜仲叶生药浓度为3~8mg/mL。4.根据权利要求1所述的方法,其中,步骤(1)中,所述杜仲叶提取物通过如下的步骤制备:(a)用水浸提杜仲叶,固液分离,得到提取液;(b)将步骤(a)得到的提取液与培养基混合,得到杜仲叶提取物;优选地,其特征在于如下i)至ix)中的一项或多项:i)步骤(a)中,在回流条件下浸提;优选地,回流温度为70℃~160℃;ii)步骤(a)中,浸提时间为0.5~5小时;iii)步骤(a)中,浸提的料液重量比为1:(1~13);iv)步骤(a)中,在浸提之前,将杜仲叶破碎;v)步骤(a)中,浸提次数为一次或多次;vi)步骤(a)中,固液分离的方式为过滤;vii)在步骤(a)和(b)之间,还包括步骤(a’):将提取液进行干燥,得到干燥物;将干燥物与水混合,得到的混合物用于与步骤(b)中的培养基混合;优选地,步骤(b)中,步骤(a’)得到的混合物与培养基的体积比为1:(4~15);viii)步骤(b)中,步骤(a)得到的提取液与培养基的体积比为1:(4~15);ix)所述杜仲叶提取物为杜仲叶提取液。5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于如下A至F中的一项或多项:A.步骤(1)中,所述保加利亚乳杆菌培养物中的活菌数为5×107CFU/mL~9×107CFU/mL,优选为6×107CFU/mL~8×107CFU/mL;B.步骤(1)中,所述保加利亚乳杆菌培养物通过如下的步骤制备:将保加利亚乳杆菌接种于培养基中,培养10~20小时,得到保加利亚乳杆菌培养物;优选地,所述培养基为液体培养基,例如MRS液体培养基;优选地,培养温度为20℃~38℃;优选地,所述保加利亚乳杆菌已活化;C.步骤(1)中,所述保加利亚乳杆菌培养物为液态;D.步骤(1)中,所述杜仲叶提取物的生药浓度为10~100mg/mL;E.步骤(1)中,所述保加利亚乳杆菌培养物与杜仲叶提取物的体积比为(1~30):3;F.步骤(1)中,采用移液器搅拌进行混合。6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法,其中,步骤(1)中,将培养基、保加利亚乳杆2CN110960567A权利要求书2/2页菌培养物和杜仲叶提取物混合;优选地,所述培养基与杜仲叶提取物的体积比为(1~30):3;优选地,所述培养基为液体培养基。7.一种抑菌组合物,其由权利要求1至6中任一项所述方法制备得到。8.根据权利要求7所述的抑菌组合物,其中,所述抑菌组合物中的保加利亚乳杆菌活菌数为6×107~8×107CFU/mL。9.根据权利要求7或8所述的