一种啤酒废酵母的综合利用方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115747278A(43)申请公布日2023.03.07(21)申请号202211483979.3C12P21/06(2006.01)(22)申请日2022.11.24C12P21/00(2006.01)(71)申请人青岛啤酒股份有限公司地址266023山东省青岛市市北区登州路56号(72)发明人尹花王剑锋胡淑敏张宇昕杨朝霞李梅陈华磊闫鹏史雅琦(74)专利代理机构青岛清泰联信知识产权代理有限公司37256专利代理师张洁(51)Int.Cl.C12P19/08(2006.01)C12P19/14(2006.01)C12P19/04(2006.01)权利要求书2页说明书10页附图3页(54)发明名称一种啤酒废酵母的综合利用方法(57)摘要本发明提出一种啤酒废酵母的综合利用方法，属于废酵母综合回收利用领域，能够解决现有废酵母回收利用方法存在酵母大量损失、酸碱试剂残留的问题。主要包括：向由废酵母配置成的酵母溶液中添加复合酶A一次酶解，离心得上清液和沉淀；将一次酶解所得沉淀复溶后均利用复合酶B对其进行二次酶解和三次酶解，离心得上清液和沉淀；将三次酶解所得沉淀复溶后沸水浴震荡提取，离心得酵母β‑葡聚糖沉淀和含酵母多糖的上清液；对酵母β‑葡聚糖沉淀NaOH沸水浴浸提和四次酶解，离心得上清液冷冻干燥后，得水溶性酵母β‑葡聚糖；含酵母多糖的上清液经冷冻干燥后得到酵母多糖添加剂。本发明具有操作简单、提取物回收率高且能实现废酵母零损失的特点。CN115747278ACN115747278A权利要求书1/2页1.一种啤酒废酵母的综合利用方法，其特征在于，包括以下步骤：一次酶解：称取适量啤酒废酵母配置酵母溶液，添加复合酶A进行一次酶解，离心得上清液和沉淀；二次酶解：将所述一次酶解所得沉淀复溶后，添加复合酶B进行二次酶解，离心得上清液和沉淀；三次酶解：将所述二次酶解所得沉淀复溶，添加所述复合酶B进行三次酶解，离心得上清液和沉淀；沸水浴震荡：将所述三次酶解所得沉淀复溶后进行沸水浴震荡提取，离心得酵母β‑葡聚糖沉淀和含酵母多糖的上清液；酵母β‑葡聚糖提取：所述酵母β‑葡聚糖沉淀依次经过3％NaOH沸水浴浸提和四次酶解后，离心得到的上清液再经冷冻干燥后，得到水溶性酵母β‑葡聚糖；酵母多糖制备：所述含酵母多糖的上清液经冷冻干燥后得到酵母多糖添加剂或者与上清液无水乙醇混合后，沉淀得到酵母甘露聚糖蛋白。2.根据权利要求1所述的啤酒废酵母的综合利用方法，其特征在于，所述一次酶解包括以下步骤：啤酒废酵母与清水按照1:(10‑20)的料水比混合配置酵母溶液，向所述酵母溶液中添加复合酶A至总酶活达(40000‑60000)U/g(原料干重)，于50‑60℃条件下酶解5‑7h后，离心得上清液和沉淀。3.根据权利要求2所述的啤酒废酵母的综合利用方法，其特征在于，所述复合酶A由中性蛋白酶和木瓜蛋白酶组成，所述中性蛋白酶和木瓜蛋白酶的添加比例为(0.53‑1)：(0.48‑1)。4.根据权利要求1所述的啤酒废酵母的综合利用方法，其特征在于，所述二次酶解包括以下步骤：将所述一次酶解所得沉淀与清水按照1:(10‑40)的料水比混合复溶后，添加复合酶B至总酶活达(40000‑60000)U/g(沉淀干重)，于50‑60℃条件下酶解7‑11h后，离心得上清液和沉淀；所述三次酶解包括以下步骤：将所述二次酶解所得沉淀与清水按照1:(10‑40)的料水比混合复溶后，添加复合酶B至总酶活达(40000‑60000)U/g(沉淀干重)，于50‑60℃条件下酶解5‑7h后，离心得上清液和沉淀。5.根据权利要求4所述的啤酒废酵母的综合利用方法，其特征在于，所述复合酶B由中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶组成，所述中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶的添加比例为(1/3‑1)：(1/3‑1)：(1/3‑1)。6.根据权利要求1所述的啤酒废酵母的综合利用方法，其特征在于，在所述沸水浴震荡步骤中得到的酵母β‑葡聚糖沉淀中酵母β‑葡聚糖为黄褐色水不溶性酵母β‑葡聚糖，所述黄褐色水不溶性酵母β‑葡聚糖纯度为80±4％，提取率为23.0‑25.9％。7.根据权利要求1所述的啤酒废酵母的综合利用方法，其特征在于，所述酵母β‑葡聚糖提取包括以下步骤：沸水浴浸提：所述酵母β‑葡聚糖沉淀使用3％NaOH沸水浴浸提1h后，经离心、水洗沉淀、2CN115747278A权利要求书2/2页再次离心、无水乙醇冲洗沉淀后，最后经过离心处理得到沉淀，上清液无水乙醇备用；四次酶解：将沸水浴浸提步骤中最后经过离心处理得到的沉淀用清水复溶，添加β‑1,3‑葡聚糖酶和β‑1,6‑葡聚糖酶至总酶活为10000U/g(沉淀干重)，于50‑60℃条件下震荡提取10‑16h，离心得上清液再经冷