基于液相色谱-串联质谱法同时测定汤中嘌呤含量的方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115980228A(43)申请公布日2023.04.18(21)申请号202310095377.9G01N30/06(2006.01)(22)申请日2023.02.06G01N30/14(2006.01)G01N30/72(2006.01)(71)申请人仲恺农业工程学院G01N30/04(2006.01)地址510000广东省广州市海珠区纺织路东沙街24号申请人广州质量监督检测研究院梅州市金绿现代农业发展有限公司(72)发明人曾晓房董浩冼燕萍李莹莹白卫东杨娟陈伟波张远红魏先领肖小烽(74)专利代理机构广东聚创智合知识产权代理有限公司44817专利代理师胡拥军(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)权利要求书1页说明书7页附图2页(54)发明名称基于液相色谱-串联质谱法同时测定汤中嘌呤含量的方法(57)摘要本发明提供了基于液相色谱‑串联质谱法同时测定汤中嘌呤含量的方法。所述基于液相色谱‑串联质谱法同时测定汤中嘌呤含量的方法，包括如下步骤：配制标准溶液：将黄嘌呤、腺嘌呤、鸟嘌呤、次黄嘌呤分别配置成对照品标准溶液，并制作标准曲线；将样品稀释后进行离心，再加入三氟乙酸和甲酸进行水浴加热，再进行第二次离心，过滤后得到样品溶液；可以更加快速提取、更加准确测定汤中四种嘌呤含量，回收率高，检测灵敏度高，重现性好，能够满足相关检测要求。CN115980228ACN115980228A权利要求书1/1页1.基于液相色谱‑串联质谱法同时测定汤中嘌呤含量的方法，其特征在于，包括如下步骤：S001：配制标准溶液：将黄嘌呤、腺嘌呤、鸟嘌呤、次黄嘌呤分别配置成对照品标准溶液，并制作标准曲线；S002：将样品稀释后进行离心，再加入三氟乙酸和甲酸进行水浴加热，再进行第二次离心，过滤后得到样品溶液；S003：使用液相色谱‑串联质谱法对样品溶液中嘌呤含量检测；其中，所述三氟乙酸的加入量为0.9‑1.1mL；所述甲酸的加入量为0.9‑1.1mL。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S001中：分别配置2mg/L、1mg/L、500μg/L、300μg/L、200μg/L、50μg/L浓度的黄嘌呤、腺嘌呤、鸟嘌呤、次黄嘌呤对照品标准溶液。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S002具体包括如下步骤：将汤样品溶液进行第一次离心，再加入三氟乙酸和甲酸，水浴震荡，再使用氮吹将样品溶液吹干，再进行第二次离心，过滤后得到滤液。4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述三氟乙酸和甲酸浓度均为80‑100％。5.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述样品溶液用0.22μm的滤膜过滤。6.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述第一次离心的转速为12000‑13000r/min。7.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述第二次离心的转速为4100‑4300r/min。8.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述氮吹的温度为53‑57℃。9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S001的具体步骤如下：在相同的色谱质谱条件下，等体积对标准溶液准确进样，采集不同浓度的标准溶液提取离子色谱图，各待测物以定量离子峰面积与对应的外标物定量离子峰面积比值为纵坐标，组分浓度与内标物浓度比值为横坐标，绘制标准工作曲线，得到线性回归方程。10.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S003的具体步骤如下：制备得到的样品溶液进行液相色谱‑串联质谱测定，将测定的数据代入的线性回归方程，计算获得供试品中的嘌呤含量。2CN115980228A说明书1/7页基于液相色谱‑串联质谱法同时测定汤中嘌呤含量的方法技术领域[0001]本发明属于食品检测技术领域，具体涉及基于液相色谱‑串联质谱法同时测定汤中嘌呤含量的方法。背景技术[0002]老火靓汤又称广式老火汤，是一道色香味俱全的传统名肴，深受广东消费者欢迎。常言道：“宁可食无肉，不可食无汤。”，可见广式老火汤在人们心中的极高地位。目前有关汤的安全性研究极少，尤其嘌呤含量研究，因而不能为广府汤爱好者提供更准确的饮食指导。随着《“健康中国2030”规划纲要》的印发，提高日常饮食的健康水平逐渐得到越来越多人的关注。然而，关于老火汤中嘌呤的含量水平尚未见报道。[0003]嘌呤是一种由嘧啶环和咪唑环稠合而成的双杂环化合物，主要分为鸟嘌呤、腺嘌呤、黄嘌呤、次黄嘌呤及其衍生物。腺嘌呤和鸟嘌呤是构成遗传物质的重要碱基化合物，黄嘌呤、次黄嘌呤以及尿酸是嘌呤碱基在人体内新陈代谢后的产物。[0004]食品总嘌呤含量高低与导致高尿酸血症概率大小无明显联系，在四种嘌呤中，只有腺嘌呤和次黄嘌呤会对人体血尿酸浓度产生影响，且次黄嘌呤的影响更强。嘌呤的代谢差异启发人们对四种嘌呤含量分开研究