一种酶法脱胶方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105349255A(43)申请公布日2016.02.24(21)申请号201510757789.X(22)申请日2015.11.06(71)申请人华南理工大学地址511458广东省广州市南沙区环市大道南路25号华工大广州产研院(72)发明人王永华陈华李志刚杨博王卫飞陈华勇莫宗超杨良华(74)专利代理机构广州市华学知识产权代理有限公司44245代理人宫爱鹏(51)Int.Cl.C11B3/00(2006.01)权利要求书1页说明书4页(54)发明名称一种酶法脱胶方法(57)摘要一种酶法脱胶方法，包括以下步骤：(1)配置磷脂酶浓度为1-30000U/mL的酶液，向酶液中添加可溶性盐、亲水性溶剂和富含磷脂的脂类，配成三液相体系；所述可溶性盐、亲水性溶剂和脂类与酶液的质量比分别为0.1-0.9、0.1-5和0.1-10；(2)将三液相体系置于反应器中恒温摇床反应，反应结束后，静置或离心至分为四层，从上自下依次为上液层、类固层、中液层和下液层，磷脂主要富集于类固层，收集上液层产物即为脱除磷脂的脂类产品。该方法具有能耗小、原料利用率高、反应条件温和等优点，解决了现有酶法脱除并同步回收油中磷脂难于工业化的技术难题。CN105349255ACN105349255A权利要求书1/1页1.一种酶法脱胶方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)配置磷脂酶浓度为1-30000U/mL的酶液，向酶液中添加可溶性盐、亲水性溶剂和富含磷脂的脂类，配成三液相体系；所述可溶性盐、亲水性溶剂和脂类与酶液的质量比分别为0.1-0.9、0.1-5和0.1-10；(2)将三液相体系置于带搅拌反应器中反应，反应结束后，静置或离心至分为四层，从上自下依次为上液层、类固层、中液层和下液层，磷脂主要富集于类固层，收集上液层产物即为脱除磷脂的脂类产品。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述亲水性溶剂为聚乙二醇、聚丙二醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、乙二醇和丙酮中的一种或两种以上。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述亲水性溶剂为[BMIM]Br、[BMIM]BF4、[EMIM]ETSO4和[OMIM]Cl中的一种或两种以上。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述可溶性盐是柠檬酸钠、氯化钠、硫酸铵、碳酸钠、磷酸氢二钾、磷酸钾、磷酸二氢钾和磷酸氢二钾中的一种或两种以上。5.根据权利要求1或2或3或4所述的方法，其特征在于，步骤(2)的反应条件为：温度20-90℃，反应时间为0.01-50h。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述三液相体系的pH值为3-13。7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述三液相体系的pH值为4-8。8.根据权利要求1或2或3或4所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述磷脂酶浓度为5-2000U/mL。9.根据权利要求1或2或3或4所述的方法，其特征在于，所述可溶性盐、亲水性溶剂和脂类与酶液质量比分别为0.2-0.8、0.2-0.8和0.2-4。10.根据权利要求1或2或3或4所述的方法，其特征在于，所述脂类为鱼油、大豆毛油、水化脱胶油或南极磷虾油。2CN105349255A说明书1/4页一种酶法脱胶方法技术领域[0001]本发明属于生物工程与食品技术领域，涉及到酶的分离与应用技术，特别涉及到利用酶法脱胶的方法。背景技术[0002]近年来，选择性水解以脱除油中磷脂受到了广泛的关注。由于油中的磷脂会引起油的酸败和反色，因此全球每年要通过水洗、酸洗以及酶解等复杂工艺处理4500万吨以上大豆油，使含磷量降至10ppm以下。而经水解后的功能多样的磷脂尤其是改性磷脂在食品、医药、化妆品、饲料等多个领域均有广泛的应用(20万吨以上)。[0003]在诸多脱除及改性磷脂的方法中，利用磷脂酶选择性水解油中磷脂，使其失去脂肪酸而形成极性更强的功能性溶血磷脂或甘油磷脂酰胆碱由于具有条件温和、能耗低、副产物少等优势受到了广泛的关注。但是，由于传统油水体系过低的酶催化效率，导致整个酶催化过程耗时过久，效率极低，加上磷脂成分复杂，因此加大了工艺对分离的要求，难度大。近年来，为了解决这些难题，科学家进行了大量的尝试。例如，Jiang等利用超声辅助磷脂酶从大豆油中脱除磷脂，可将总反应时间从5h降低至3h，另外，这种方法会导致油的氧化稳定性减弱，并且酶易失活，产物分离难度加大，同时，反应的速率依然较慢(UltrasonicsSonochemistry21，2014，142-148)。Maiti等利用反胶束体系获得较高的酶活力，但是体系后期油水分离以及酶的回用困难限制了其进一步实际应用(Chem.Commun.,2011,47,9864.)。但