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本发明公开用于骨质损伤修复的上清凝胶干细胞培养基及制备方法,所述培养基包括:体积比为1:0.2~0.5:0.01~0.05的IMDM培养基、骨髓间充质干细胞悬浮液和神经诱导化合物溶液。该制备方法包括如下步骤:步骤SS1:按体积比为1:0.2~0.5:0.01~0.05分别制备IMDM培养基、骨髓间充质干细胞悬浮液和神经诱导化合物溶液;步骤SS2:将所述步骤SS1制备的神经诱导化合物溶液加入所述步骤SS1制备的IMDM培养基中,制备诱导培养基溶液;步骤SS3:将所述步骤SS1制备的骨髓间充质干细胞悬浮液加入所述步骤SS2制备的诱导培养基溶液中混合,制得上清凝胶干细胞培养基。本发明彻底解决诱导获得定向分化效率高、存活率高的骨髓去分化间充质干细胞以供应骨质损伤修复而非表层创面愈合的技术需求。