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本发明属于肿瘤疾病诊断试剂技术领域,具体公开了一种用于肿瘤疾病早期诊断的试剂盒、方法及应用。所述试剂盒包括肿瘤外泌体的特异性捕获检测系统和分子信标荧光检测系统;其中,所述肿瘤外泌体的特异性捕获检测系统包括肿瘤外泌体特异性配体修饰的四氧化三铁核心的磁性金纳米球复合物溶液和外泌体特异性配体修饰的金纳米笼溶液;所述分子信标荧光检测系统包括带有荧光基团的分子信标探针、带有荧光基团的荧光扩增底物杂交链、缓冲液。本发明的试剂盒及检测方法将肿瘤外泌体的特异性捕获分析和分子信标荧光检测方法结合使用,大大提高了肿瘤早期诊断的精准度与可靠性。