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植物单基因或多基因CRISPR激活技术的载体及构建方法、应用.pdf

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本发明公开了植物单基因或多基因CRISPR激活技术的载体及构建方法、应用,所述载体为能表达sgRNA的TRV2载体;TRV2载体内包含表达sgRNA2.0的模块proPeBV?BsaI?BsaI?sgRNA2.0,序列如SEQIDNO.9所示;其中,两个BsaI位点为sgRNA插入位点,采用序列如SEQIDNO.10和SEQIDNO.11所示的引物扩增SEQIDNO.9序列,并插入到TRV2载体多克隆位点,获得表达sgRNA2.0模块的TRV2?SG2.0。本发明所述载体只需完成一次番茄遗传转化,获得SlAct3.0line植株后,仅需针对不同的靶标基因构建含有靶向其启动子区sgRNA的TRV2载体,并侵染SlAct3.0line植株,在3周内即可快速高效的获得不同靶基因的过表达植物材料,而通过传统的遗传转化获得基因过表达植株则需要将近1年的时间,因此该方法更加快捷高效,省时省力,极大缩短了试验周期。