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食品保藏技术有哪些论文摘要:研究利用保藏在-70℃超低温冰箱的5个金针菇菌种(保藏期2年)和保藏在4℃冰箱的5个金针菇菌种(保藏期为6个月)为材料,比较和评价两种保藏方法:(1)在PDA平板上两种保藏方法在菌丝的宏观形态、微观形态上的差异;(2)在液体培养条件下比较其子实体的分化情况;(3)在固体培养条件下比较其子实体的分化情况。结果表明:(1)两种不同的保藏方法金针菇在菌丝的宏观形态、微观形态上都没有差异。菌丝的分枝、锁状联合及横隔都非常明显,说明金针菇菌株没有发生变异。(2)在液体培养条件下,实验组和对照组的情况一致。(3)在固体培养条件下,所有菌种实验组和对照组在子实体外观形态上没有特别明显的差异,可以说明没有发生变异。通过拮抗实验观察到不同保藏条件下的菌种之间没有出现拮抗现象,表明在-70℃低温冰箱保藏2年后的菌种没有发生基因的变异。关键词:金针菇菌种保藏保藏效果评定1前言1.1金针菇概况金针菇(Flammulinavelutpes),隶属真菌门、担子菌亚门、蘑菇目、口蘑科、类火菇属,是世界上著名的食药两用菌和观赏菌。1.2营养价值金针菇的营养保健作用日益引起人们的重视,目前以金针菇为原料加工的产品有金针菇豆奶、金针菇酸奶、金针菇酱、金针菇可乐、金针菇果冻、金针菇啤酒、金针菇菇脯、金针菇冰淇淋、金针菇挂面、金针菇火腿肠、金针菇保健饮料等。金针菇的营养极其丰富,据日本学者研究指出,金针菇柄中含的大量食物纤维,有极好的食疗作用,是一种极好的保健食品。日本用金针菇菌丝体的醣噻胺的生物活性物质来生产了一种新型的抗癌剂,治癌剂副作用小,用于外科手术后的辅助治疗效果也十分明显。1.3菌种保藏技术概况金针菇的经济实用价值高,而种植金针菇的关键是优良性状的菌种。目前菌种保藏的方法包括:常规低温继代保藏、液氮超低温保藏、冷冻干燥保藏、-86℃深度低温保藏、石蜡封存、寄主保存、土壤保藏法、硅胶保藏法、滤纸条保藏法、蒸馏水保藏法等,其中液氮超低温冷冻保藏法效果最好。但液氮保藏系统成本高,一般不能单独依靠这一保藏技术。且液氮保藏的菌种必需培养在琼脂培养基或液体培养基中,不利于邮寄交流。Fritssdu首先在荷兰Horst发现杂交菌株U1经液氮保藏三年后出现退化,部分培养物产量下降,出现硬开伞,经组织分离培养后,产质量又恢复正常。分析表明:经原生质体重新融合产生的杂交菌株,其本身对不利因素(如超低温的刺激)适应性差,在液氮保藏中必须考虑到这方面的影响;反复的冷冻和解冻也会使菌株受到不同程度的损伤。对菌种保藏方面所存在的相关问题有待更深入的研究。1.4菌种质量检测食用菌菌种的生物学特征、对基质分解能力、遗传特征、生产出菇能力等方面需进行质量检测。正常的菌丝一般具有透明、分枝状,有横隔和明显的锁状联合;仅有单核菌丝,不具结实性异宗结合的食用菌不宜作菌种;锁状联合多而密的双核菌丝结菇力强,一般是好菌种。在适宜的条件下,若菌丝长速正常、粗壮、浓密、整齐,一般为优质菌种。最后通过拮抗试验,观察菌丝接触区有无对峙反应。若无褐色的带线出现,表示两个受检菌株的基因极相似或相同;反之,是不同的菌株。本次实验尝试用低温冰箱保藏菌种。须测定保藏后的菌种是否仍存活,有否变异。由于条件所限,只选5个菌种进行菌丝形态观察、菌丝生长速度测量、液体及固体培养基出菇实验和拮抗实验。2材料与方法2.1材料与仪器2.1.1菌种菌种是在-70℃冰箱用离心管保藏两年的5株不同的金针菇菌种Fla2、Fla3、Fla4、Fla5、Fla7,及其在4℃冰箱用试管保藏半年的菌种。2.1.2培养基(1)活化及菌丝观察培养基:马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基。(2)液体培养基:马铃薯葡萄糖培养基。(3)固体培养基:棉籽壳培养基。2.2方法2.2.1菌种的活化在严格的无菌条件及超净工作台下操作。4℃冰箱常规保藏的菌种:从试管里取出包括气生菌丝和基内菌丝的菌块,然后接到PDA斜面中,每个种重复4次;-70℃冰箱离心管保藏菌种:同样处理。接种后在22℃恒温培养箱中培养。2.2.2平板菌丝培养在PDA固体培养基表面放无菌盖玻片,每个培养皿放3片。从活化菌种试管取大小相仿的菌块进行接种,每个种接4个平板,每个温度保藏的已活化菌种做2个平行。接种后在22℃恒温培养箱培养,测量菌丝平均生长速度。2.2.3液体栽培出菇实验在超净台里,从活化菌种的试管里取出几块大小相仿的菌块放进PDA液体培养基中,每个菌种接4瓶,两瓶为4℃冰箱常规保藏的已活化的菌种,另两瓶为-70℃冰箱离心管保藏的已活化的菌种。接种后置于22℃恒温培养箱静置培养。2.2.4固体栽培出菇实验按配方称取各种成分,把糖溶于水中,与干料混合,搅拌均匀,装袋。在1.5kg/cm2的压力下,灭菌115min。培养基灭菌后冷却到25℃左右时进行接种,整个过程都