新、支二联灭活疫苗及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN102716478A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN102716478A(43)申请公布日2012.10.10(21)申请号201210212838.8(22)申请日2012.06.26(71)申请人普莱柯生物工程股份有限公司地址471000河南省洛阳市高新区凌波路5号(72)发明人张许科孙进忠乔荣岑(74)专利代理机构北京华夏正合知识产权代理事务所(普通合伙)11017代理人韩登营(51)Int.Cl.A61K39/295(2006.01)A61K39/215(2006.01)A61K39/17(2006.01)A61K47/44(2006.01)A61K47/24(2006.01)A61P31/14(2006.01)权利要求书权利要求书11页页说明书说明书55页页(54)发明名称新、支二联灭活疫苗及其制备方法(57)摘要本发明公开了一种二联油乳剂疫苗的生产方法，具体地说，是鸡新城疫、传染性支气管炎二联灭活疫苗的生产方法，包括：同胚接种，调整新城疫、传染性支气管炎两种病毒的浓度及比例，以达到合理搭配，并且通过调整疫苗中佐剂的成分，使其不含有硬脂酸铝。该疫苗能使新城疫及传染性支气管炎抗体同时产生，减少干扰现象，不含硬脂酸铝，能在较长时间内保持较高的抗体产生能力，并解决注射疫苗引起的动物的应激反应以及疫苗残留问题。CN1027648ACN102716478A权利要求书1/1页1.一种新城疫、传染性支气管炎二联油乳剂灭活疫苗，其特征在于由1体积的水相与2体积的油相构成，其中水相由能够诱导宿主免疫应答的疫苗抗原、亲水性非离子型表面活性剂和水构成，油相由矿物油、卵磷脂、丙二醇、异甘露醇单油酸脂和亲油性非离子型表面活性剂构成。2.根据权利要求1所述油乳剂灭活疫苗，其特征在于，所述疫苗抗原为通过同胚接种而得到的新城疫、传染性支气管炎两种抗原混合物。3.根据权利要求1所述油乳剂灭活疫苗，其特征在于，所述亲水性非离子型表面活性剂为吐温-80。4.根据权利要求1所述油乳剂灭活疫苗，其特征在于，所述亲油性非离子型表面活性剂为司盘-80。5.根据权利要求1所述油乳剂灭活疫苗，其特征在于，所述矿物油为白油佐剂。6.一种如权利要求1~5任意一项的油乳剂灭活疫苗的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1）调整新城疫、传染性支气管炎种毒的浓度，以达到合理搭配；2）将调整后浓度的新城疫、传染性支气管炎种毒按比例混合；3）将混合毒种接种于9-11日龄易感鸡胚；4）孵化，收胚液；5）将收获的胚液进行灭活；6）灭活后加入佐剂乳化，即成新城疫、传染性支气管炎二联灭活疫苗。7.根据权利要求6所述油乳剂灭活疫苗，其特征在于，步骤1）中新城疫种毒的稀释浓46度为10EID50，传染性支气管炎种毒的稀释浓度为10EID50。8.根据权利要求6所述油乳剂灭活疫苗，其特征在于，步骤2）中新城疫、传染性支气管炎种毒的混合比例为1:1。2CN102716478A说明书1/5页新、支二联灭活疫苗及其制备方法技术领域[0001]本发明属于兽用生物制品技术领域，具体涉及新城疫、传染性支气管炎二联灭活疫苗及其制备方法。背景技术[0002]新城疫病毒（Newcastlediseasevirus,NDV）又称亚洲鸡瘟病毒、伪鸡瘟病毒或禽肺脑炎病毒。在病毒分类学中的位置属于副黏病毒科（Paramyxoviridae）、副黏病毒属（Paramyxovirus）中的一个种。该病毒主要危害鸡、珠鸡和火鸡，在被侵袭的鸡群中迅速传播，强毒株可使鸡群全群毁灭。弱毒株仅引起鸡群呼吸道感染和产蛋量下降，但可迅速康复。人类可因接触病禽和活毒疫苗而引起结膜炎或淋巴腺炎，但很快便康复。新城疫病毒被OIE规定为A类疫病，是一种急性、高度接触性传染病，发病率和死亡率都在90%以上，1935年梁英、马闻天等首次证实我国有该病的流行，现在本病被我国列为Ⅰ类疫病。[0003]新城疫病毒的所有毒株都能凝集多种禽类和哺乳动物的红细胞，在病毒的血凝试验中，鸡的红细胞最为常用。该病毒可在9-12日龄的鸡胚绒毛尿囊膜上和尿囊腔中培养。[0004]鸡传染性支气管炎（AvianInfectiousBornchistis,IB）是由鸡传染性支气管炎病毒（InfectiousBornchistisVirus，IBV）引起的一种急性、接触性、病毒性传染病。该病主要侵害鸡的呼吸系统、泌尿生殖系统和消化系统等，其感染的主要特征是气管锣音、喷嚏和肾脏肿大。此外，该病还可以引起蛋鸡产蛋量下降和蛋品质下降，但死亡率通常较低，雏鸡可由于呼吸道或肾脏的感染而死亡。IBV能在9-11日龄的鸡胚中生长。[0005]近年来，伴随着畜禽养殖规模的不断扩大，生物制品行业也得到了迅速发展，尤其是生物技术的不断更新使疫苗产