一种疫苗组合物及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CNCN104208666104208666A(43)申请公布日2014.12.17(21)申请号201310213645.9A61K38/16(2006.01)(22)申请日2013.05.31C07K14/00(2006.01)A61P11/02(2006.01)(83)生物保藏信息A61P11/00(2006.01)CCTCCNO:M20112212011.06.28A61P31/04(2006.01)CCTCCNO:M20122302012.06.13A61K39/10(2006.01)CCTCCNO:M20112232011.06.28CCTCCNO:M20112222011.06.28(71)申请人普莱柯生物工程股份有限公司地址471000河南省洛阳市高新区凌波路5号(72)发明人张许科孙进忠田克恭(74)专利代理机构北京华夏正合知识产权代理事务所(普通合伙)11017代理人韩登营(51)Int.Cl.权利要求书2页权利要求书2页说明书16页说明书16页A61K39/102(2006.01)序列表5页序列表5页(54)发明名称一种疫苗组合物及其制备方法和应用(57)摘要本发明提供了一种疫苗组合物，该疫苗组合物包括：免疫量的支气管败血波氏杆菌抗原、免疫量的多杀性巴氏杆菌的类毒素抗原及兽医学上可接受的佐剂。该疫苗组合物能有效的防治由支气管波氏杆菌、多杀性巴氏杆菌引起的混合感染的猪萎缩性鼻炎，及进一步包括其他其他抗原成分，防治由猪萎缩性鼻炎继发感染的呼吸系统综合征。本发明通过减少抗原成分，用多杀性巴氏杆菌类毒素来替代多杀性巴氏杆菌不同血清型的抗原，达到了预防猪萎缩性鼻炎的目的；还通过提高疫苗组合物单位体积的抗原含量，使疫苗组合物免疫剂量降低到现有疫苗的1/4剂量，免疫效果没有降低。因此，本发明提供了一种免疫剂量更低，抗原成分更少，免疫成本更低，使用方便的疫苗组合物。CN104208666ACN104286ACN104208666A权利要求书1/2页1.一种疫苗组合物，包括：免疫量的支气管败血波氏杆菌抗原，免疫量的多杀性巴氏杆菌的类毒素抗原及兽医学上可接受的佐剂。2.根据权利要求1所述的疫苗组合物，其中所述支气管败血波氏杆菌抗原选自下列形式的一种或几种：1）灭活形式的支气管败血波氏杆菌抗原，2）改良的活的形式或减毒形式的支气管败血波氏杆菌抗原，3）含有支气管败血波氏杆菌免疫原性氨基酸序列的嵌合细菌，4）含有支气管败血波氏杆菌免疫原性氨基酸序列的多肽或亚单位成分；优选地，所述支气管败血波氏杆菌抗原选自灭活形式的支气管败血波氏杆菌全菌抗原；更优选地，所述支气管败血波氏杆菌抗原为支气管败血波氏杆菌HN8株灭活株。3.根据权利要求1所述的疫苗组合物，其中所述多杀性巴氏杆菌的类毒素抗原选自下列形式的一种或几种：1）天然毒素的灭活形式的多杀性巴氏杆菌类毒素，2）人工合成的多肽形式的多杀性巴氏杆菌类毒素，3）含有多杀性巴氏杆菌的类毒素免疫原性氨基酸序列的嵌合细菌，4）含有多杀性巴氏杆菌类毒素免疫原性氨基酸序列的多肽或亚单位成分；优选地，所述多杀性巴氏杆菌的类毒素抗原选自天然毒素的灭活形式、人工合成的多肽形式的多杀性巴氏杆菌类毒素；更优选地，所述多杀性巴氏杆菌的类毒素抗原为多杀性巴氏杆菌D型HB4株类毒素和/或氨基酸序列如SEQIDNO.1或SEQIDNO.2或SEQIDNO.3中的一种或几种多肽。4.一种用于猪萎缩性鼻炎合成肽疫苗的多肽，其中所述的多肽的氨基酸序列如SEQIDNO.1或SEQIDNO.2或SEQIDNO.3所示。5.一种疫苗组合物，包含氨基酸序列如SEQIDNO.1或SEQIDNO.2或SEQIDNO.3所示的多肽的一种或几种组合。6.根据权利要求1所述的疫苗组合物，其中，所述的支气管败血波氏杆菌抗原含量为3×109～1.5×1010CFU/ml，所述多杀性巴氏杆菌的类毒素抗原含量为1～150μg/ml。7.一种制备所述疫苗组合物的方法，包括：1）培养增殖支气管败血波氏杆菌，并灭活；2）培养增殖多杀性巴氏杆菌，收集PMT毒素并灭活，或者人工合成PMT多肽抗原；3）按比例混合所述灭活的支气管败血波氏杆菌抗原，多杀性巴氏杆菌PMT类毒素抗原或者PMT多肽抗原，加入佐剂，乳化。8.根据权利要求1所述的疫苗组合物，其中所述的疫苗组合物进一步包括至少一种能有效对抗猪萎缩性鼻炎继发感染的呼吸系统综合征的其他生物的免疫原活性成分；优选地，所述能有效对抗猪萎缩性鼻炎继发感染的呼吸系统综合征的其他生物的免疫原活性成分选自下列生物的抗原：猪肺炎支原体；猪鼻支原体；蓝耳病病毒；猪圆环病毒2型；猪伪狂犬病毒；副猪嗜血杆菌；传染性胸膜肺炎；猪流感病毒。9.