草莓HY5基因在调控草莓果实成熟周期中的应用、过表达载体及方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115896167A(43)申请公布日2023.04.04(21)申请号202211349317.7A01H5/08(2018.01)(22)申请日2022.10.31A01H6/74(2018.01)C12R1/01(2006.01)(71)申请人江苏省农业科学院地址210014江苏省南京市孝陵卫钟灵街50号(72)发明人陈晓东王庆莲赵密珍王静关玲夏瑾许林林袁华招庞夫花蔡伟建吴娥娇(74)专利代理机构北京轻创知识产权代理有限公司11212专利代理师孟鹏超(51)Int.Cl.C12N15/84(2006.01)C12N15/29(2006.01)C12N1/21(2006.01)权利要求书1页说明书7页序列表（电子公布）附图1页(54)发明名称草莓HY5基因在调控草莓果实成熟周期中的应用、过表达载体及方法(57)摘要本发明涉及基因工程技术领域，具体而言，涉及草莓HY5基因在调控草莓果实成熟周期中的应用、过表达载体及方法。该方法为构建含有草莓HY5基因的过表达载体，将所述过表达载体导入宿主菌，采用所述宿主菌对草莓果实进行瞬时遗传转化。HY5基因的过量表达可以使草莓果实延迟成熟，实现草莓经济效益的最大化。该方法可将草莓成熟时间延迟7～10天，并且保持果实大小、色泽和品质不受影响；该方法操作简单、调控效率高、调控效果好，可实现大规模推广。CN115896167ACN115896167A权利要求书1/1页1.草莓HY5基因在调控草莓果实成熟周期中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，在草莓中过量表达所述HY5基因，延长草莓果实的成熟周期。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述草莓HY5基因的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示。4.一种用于调控草莓果实成熟的过表达载体，其特征在于，所述过表达载体上含有草莓HY5基因的核苷酸序列。5.一种用于调控草莓果实成熟的宿主菌，其特征在于，所述宿主菌中含有如权利要求4所述的过表达载体。6.一种采用草莓HY5基因调控草莓果实成熟周期的方法，其特征在于，构建含有草莓HY5基因的过表达载体，将所述过表达载体导入宿主菌，采用所述宿主菌对草莓果实进行瞬时遗传转化。7.根据权利要求6所述一种采用草莓HY5基因调控草莓果实成熟周期的方法，其特征在于，所述过表达载体为pMON530‑HY5。8.根据权利要求6所述一种采用草莓HY5基因调控草莓果实成熟周期的方法，其特征在于，所述宿主菌为农杆菌GV3101感受态。9.根据权利要求6所述一种采用草莓HY5基因调控草莓果实成熟周期的方法，其特征在于，所述瞬时遗传转化的步骤为，将含有所述农杆菌GV3101感受态的溶液注射至草莓果实中。10.根据权利要求9所述一种采用草莓HY5基因调控草莓果实成熟周期的方法，其特征在于，所述草莓果实为处于白果期的草莓果实。2CN115896167A说明书1/7页草莓HY5基因在调控草莓果实成熟周期中的应用、过表达载体及方法技术领域[0001]本发明涉及基因工程技术领域，具体而言，涉及草莓HY5基因在调控草莓果实成熟周期中的应用、过表达载体及方法。背景技术[0002]草莓(FragariaananassaDuch.)属蔷薇科、蔷薇亚克科草莓属，多年生草本植物，因其香味独特、酸甜适口，素有“水果之王”的美名，是目前世界范围广泛种植的作物之一。各品种的草莓虽然成熟时间有所差异，但整体较为集中，这就导致各种草莓一般集中在1月初至5月初上市。特别是在4‑5月份，大棚中温度较高，草莓成熟较快，上市时间更加集中，严重影响了草莓的经济效益。[0003]现有技术中，为了提高经济效益，往往对草莓进行催熟以缩短其成熟时间。然而，由于草莓内的风味物质和营养物质需要足够的时间积累，才能够保证草莓果实的品质和口感，因此，催熟的草莓往往品质较差。而且，一般的催熟方式主要是通过栽培、化学手段进行，不仅成本较高，而且效果一般，甚至还会带来负面影响。[0004]虽然现有技术中也有少量的推迟草莓成熟的方法，但主要是降低温度和遮阳处理，这些方式不仅步骤繁琐难以推广，而且还会对草莓果实的发育造成影响，导致草莓果实的经济价值严重降低。[0005]HY5是植物中的bZIP家族转录因子的成员之一，在光信号通路中发挥了关键性的调控作用。HY5可以结合在基因的顺式作用元件上，包括T/G‑box(CACGTT)，E‑box(CAATTG)，GATA‑box(GATGATA)，ACE‑box(ACGT)，Z‑box(ATACGGT)，C‑box(GTCANN)等众多顺式作用元件上。HY5通过转录以及转录后水平调控了植物生命活动中的众多生命过程，比如细胞的伸长，细胞增殖，叶绿体发育，色素的积累以及营养物质的吸收