固定化自组装蛋白质多聚体.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115956090A(43)申请公布日2023.04.11(21)申请号202180031433.1(74)专利代理机构广州市华学知识产权代理有(22)申请日2021.04.27限公司44245专利代理师陈燕娴(30)优先权数据63/015,7812020.04.27US(51)Int.Cl.C07K17/00(2006.01)(85)PCT国际申请进入国家阶段日2022.10.27(86)PCT国际申请的申请数据PCT/CA2021/0505732021.04.27(87)PCT国际申请的公布数据WO2021/217251EN2021.11.04(71)申请人西西欧艾（杭州）生物医药有限责任公司地址311215浙江省杭州市萧山区经济技术开发区金一路79号D座455室权利要求书3页说明书16页(72)发明人倪合宇米格尔·内维斯序列表14页附图13页(54)发明名称固定化自组装蛋白质多聚体(57)摘要本公开提供了用于固定多聚体多肽的表面和方法，该固定保留了天然多聚体多肽的功能和活性构象。该多聚体多肽是一种自组装多聚体，并且包含第一嵌合多肽和第二嵌合多肽两者。CN115956090ACN115956090A权利要求书1/3页1.一种具有第一羟基基团和第二羟基基团以及固定在其上的至少一种自组装多聚体的表面，其中：‑所述至少一种自组装多聚体包含与第二嵌合多肽缔合的第一嵌合多肽中的至少一个，‑所述第一嵌合多肽具有式(Ia)或(Ib)：NH2–FPM–FAAL–AAT–COOH(Ia)NH2–AAT–FAAL–FPM–COOH(Ib)式中FPM是第一多肽部分；FAAL是任选的第一氨基酸接头；AAT是具有至少三个酸性氨基酸残基的酸性氨基酸尾部，所述至少三个酸性氨基酸残基各自具有包含羧基基团的R基团，并且其中所述AAT具有约3至约5的pI；并且–是胺键；‑所述第二嵌合多肽具有式(IIa)或(IIb)：NH2–SPM–SAAL–BAT–COOH(IIa)NH2–BAT–SAAL–SPM–COOH(IIb)式中SPM是第二多肽部分；SAAL是任选的第二氨基酸接头；BAT是具有至少一个酸性氨基酸残基的碱性氨基酸尾部，所述至少一个酸性氨基酸残基具有包含羧基基团的R基团，并且其中所述BAT具有约9至约11的pI；并且–是胺键；‑所述第一嵌合多肽的羧基基团共价缔合至第一硅烷接头(FSL)部分，其中所述FSL与所述表面的第一羟基基团共价缔合；‑所述第二嵌合多肽的羧基基团共价缔合至第二硅烷接头(SSL)部分，其中所述SSL与所述表面的第二羟基基团共价缔合；‑所述AAT与所述BAT非共价缔合；并且‑所述第一嵌合多肽与所述第二多肽部分非共价缔合。2.根据权利要求1所述的表面，其中所述AAT的长度为至少3个且至多50个氨基酸残基。3.根据权利要求1或2所述的表面，其中所述AAT具有约4的pI。4.根据权利要求3所述的表面，其中所述AAT具有约3.91的pI。5.根据权利要求4所述的表面，其中所述AAT具有SEQIDNO：4的氨基酸序列或者其功能变体或片段。6.根据权利要求1至5中任一项所述的表面，其中所述BAT的长度为至少1个且至多50个氨基酸残基。7.根据权利要求1至6中任一项所述的表面，其中所述BAT具有约的pI。8.根据权利要求7所述的表面，其中所述BAT具有约10.1的pI。9.根据权利要求8所述的表面，其中所述BAT具有SEQIDNO：9的氨基酸序列或者其功能变体或片段。10.根据权利要求1至9中任一项所述的表面，‑其中所述第一嵌合多肽具有所述FAAL；和/或2CN115956090A权利要求书2/3页‑其中所述第二嵌合多肽具有所述SAAL。11.根据权利要求1至10中任一项所述的表面，其中所述至少一种自组装多聚体包含表面蛋白的胞外结构域。12.根据权利要求11所述的表面，其中所述至少一种自组装多聚体中的一种或多种是活化的表面蛋白。13.根据权利要求11或12所述的表面，其中所述至少一种自组装多聚体是整联蛋白二聚体。14.根据权利要求13所述的表面，其中所述第一嵌合多肽包含αllb多肽，并且所述第二嵌合多肽包含β3多肽。15.根据权利要求14所述的表面，其中所述FPM具有SEQIDNO：2的氨基酸序列或者其功能变体或片段。16.根据权利要求14或15所述的表面，其中所述SPM具有SEQIDNO：7的氨基酸序列或者其功能变体或片段。17.根据权利要求1至16中任一项所述的表面，其中所述表面是球形表面。18.根据权利要求17所述的表面，其中所述表面是微球。19.根据权利要求18所述的表面，其中所述表面是微球二氧化硅珠粒。20.根据权利要求1至19中任一项所述的表面，其中所述表面包含平面表面。21