尘螨疫苗对过敏性哮喘疗效与机制研究及临床应用观察.doc

尘螨疫苗对过敏性哮喘疗效与机制研究及临床应用观察第一部分不同剂量粉尘螨疫苗对哮喘小鼠疗效及机制的研究目的探讨不同剂量粉尘螨疫苗对过敏性哮喘小鼠的疗效以及作用机制,特别是树突状细胞在其中的变化。方法用粉尘螨提取液建立32只雌性C57BL/6小鼠的变应性哮喘模型后,将其随机分为4组治疗:生理盐水对照组（A组）、低剂量粉尘螨疫苗治疗组（B组）、中剂量粉尘螨疫苗治疗组（C组）、高剂量粉尘螨疫苗治疗组（D组）。治疗完成后,检测各组气道反应性;观察支气管肺泡灌洗液中细胞总数计数和细胞分类计数;流式细胞仪检测骨髓来源树突状细胞的表型及相关共刺激分子的表达;ELASA测定支气管肺泡灌洗液中的IL-4、IFN-γ及树突状细胞培养上清液中IL-12等细胞因子水平。结果中剂量粉尘螨组（C组）及高剂量粉尘螨组（D组）小鼠气道反应性、骨髓来源树突状细胞成熟度、支气管肺泡灌洗液中的细胞总数、嗜酸性粒细胞计数均低于对照组（P值均<0.05）。中剂量粉尘螨组（C组）肺泡灌洗液中IFN-γ及树突状细胞培养上清液IL-12水平高于其它组（P值均<0.05）。结论中剂量和高剂量粉尘螨免疫治疗对小鼠过敏性哮喘均有效,且其疗效基本一致,树突状细胞培养上清液IL-12及肺泡灌洗液IFN-γ等少数疗效指标中剂量组优于高剂量组。治疗过程中,树突状细胞在促进免疫耐受,调节Th亚类细胞因子方面发挥了重要作用。第二部分标准化免疫治疗对哮喘儿童屋尘螨特异性IgG₄和肺功能的影响目的观察标准化屋尘螨变应原制剂免疫治疗儿童哮喘后,对其肺功能、气道反应性及血清屋尘螨特异性IgG₄、血清屋尘螨特异性IgE的影响,探讨血清抗体在免疫过程中的机制及作用。方法选择31例轻-中度屋尘螨过敏性哮喘儿童,给予标准化屋尘螨变应原制剂治疗,疗程25周,检测治疗前后肺功能指标FEV1和PEF占预计值的百分比,PC20值,血清屋尘螨特异性IgG₄和屋尘螨特异性IgE水平。结果标准化特异性免疫治疗前后哮喘患儿肺功能FEV1和PEF占预计值的百分比分别为:【（97.87±23.44）%、（99.95±29.52）%】,【（114.81±17.65）%、（116.51±19.52）%】;治疗前后PC20值分别为（1.49±2.75）mg/ml与（7.31±7.02）mg/ml;血清屋尘螨特异性IgG₄水平治疗前后分别为271.4AU/ml（436.6AU/ml）与2450.5AU/ml（2771.95AU/ml）;血清屋尘螨特异性IgE水平治疗前后分别为87.14AU/ml（70.26AU/ml）与100AU/ml（59.25AU/ml）。除了屋尘螨特异性IgE在治疗前后无显著变化（P>0.05）,其余各项指标在治疗后均有显著上升（P<0.01）。结论特异性免疫治疗能明显改善过敏性哮喘患儿的肺功能,显著降低其气道高反应性,血清屋尘螨特异性IgG4的升高在哮喘的免疫治疗中发挥了重要的保护作用。