丙泊酚、咪唑安定对大鼠肝缺血再灌注损伤时细胞凋亡的影响.doc

丙泊酚、咪唑安定对大鼠肝缺血再灌注损伤时细胞凋亡的影响目的观察丙泊酚、咪唑安定对大鼠肝缺血再灌注损伤时肝组织细胞凋亡的影响;并观察相关蛋白Bel-2、Bax表达的变化,以初步探讨其可能的作用机制。方法成年健康SD大鼠72只(山西医科大学实验动物中心),体重250-300g,按照体重由大到小编1-72号,按照随机原则分为4组:①假手术组(Sham组),②缺血再灌注组(IR组),③丙泊酚组(P组),④咪唑安定组(M组),每组18只。每组又按再灌注时间(1、3、6h)分为3个时相,每个时相各6只。制作70%肝脏缺血再灌注模型,各组分别于相应时间点处死大鼠留取左肝组织,根据需要处理标本。做光镜和透射电镜观察组织,细胞形态及超微结构的变化,确定凋亡发生。TUNEL法测定肝细胞凋亡指数(AI)。用免疫组化法观察肝缺血再灌注后不同时点肝细胞Bcl-2与Bax蛋白的表达,并利用图像分析系统进行半定量分析。结果①光镜及电镜观察:与Sham组比较,IR组肝组织改变明显;P组及M组较IR组肝组织改变减轻。②各组肝凋亡指数检测结果:与Sham组比较,各组肝组织凋亡指数增高(P＜0.05);与瓜组比较,P组、M组凋亡指数减少(P＜0.05);与P组比较,M组凋亡指数增加(P＜0.05)。IR、P、M组各组内各时相以再灌注6h最高(P＜0.05)。③各组Bcl-2、Bax蛋白表达检测结果:与Sham组比较,各组肝组织Bcl-2、Bax蛋白表达增加(P＜0.05);与IR组比较,P组、M组Bcl-2蛋白表达增加、Bax蛋白表达减少(P＜0.05):与P组比较,M组Bcl-2蛋白表达减少、Bax蛋白表达增加(P＜0.05)。结论Bcl-2、Bax基因活化启动的肝组织细胞凋亡可能参与了肝缺血再灌注损伤的发生,而丙泊酚、咪唑安定可能以通过调节Bel-2、Bax蛋白表达,使肝细胞凋亡减轻,从而在缺血再灌注发生时对大鼠肝脏有一定的保护作用,且丙泊酚的保护作用大于咪唑安定。