一株嗜酸乳杆菌LS001及其培养方法与抑制幽门螺杆菌的应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115975858A(43)申请公布日2023.04.18(21)申请号202211282768.3A61P31/04(2006.01)(22)申请日2022.10.19A23L33/135(2016.01)C12R1/23(2006.01)(83)生物保藏信息CGMCCNo.236462021.10.22CGMCCNo.236492021.10.22(71)申请人天津小薇生物科技有限公司地址300000天津市武清区开源道3号(72)发明人李云旭李华文马乐辉刘瑞峰韩清波(74)专利代理机构北京科创易佰知识产权代理事务所(普通合伙)16113专利代理师刘雪娇(51)Int.Cl.C12N1/20(2006.01)A61K35/747(2015.01)权利要求书2页说明书6页附图2页(54)发明名称一株嗜酸乳杆菌LS001及其培养方法与抑制幽门螺杆菌的应用(57)摘要本发明涉及一株嗜酸乳杆菌LS001及其培养方法与抑制幽门螺杆菌的应用，属于微生物的技术领域。所述嗜酸乳杆菌(lactobacillusacidophilus)LS001，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCCNo.23649，保藏日期为2021年10月22日，保藏机构地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。本发明提供的嗜酸乳杆菌LS001制品可以作为日常膳食食用，也可以进行日常的身体调理食用，又可以作为药品用于治疗疾病，能够很好的预防和抑制幽门螺杆菌，从而维护胃肠道内的微生态平衡。CN115975858ACN115975858A权利要求书1/2页1.一株嗜酸乳杆菌LS001，其特征在于，所述嗜酸乳杆菌(lactobacillusacidophilus)LS001，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCCNo.23649，保藏日期为2021年10月22日，保藏机构地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。2.一种如权利要求1所述的嗜酸乳杆菌LS001的高密度培养方法，其特征在于，具体步骤如下：(1)发酵菌种的活化将嗜酸乳杆菌LS001斜面保藏菌种接种至已灭菌的10‑20ml10％的脱脂乳摇瓶中进行活化，然后按照体积比1％‑5％的接种量接种于已灭菌的MRS液体培养基中，以适应菌株在培养基中的生长，活化好的菌株放于4℃冰箱中，备用；(2)种子培养按照体积比1％‑10％的接种量将步骤(1)活化好的菌种接种于已灭菌的MRS液体培养基中，37℃静置培养12‑36h；(3)发酵培养将步骤(2)培养好的种子液按照1％‑10％的接种量转接至已灭菌的改良肉汤培养基中，于30‑37℃，50‑200rpm，0.01‑0.02Mpa培养12‑36h，培养过程中流加60％‑70％葡萄糖溶液，通过流加氨水控制发酵液pH值为5.5‑6.0，得到高密度的嗜酸乳杆菌LS001发酵液。3.如权利要求2所述的高密度培养方法，其特征在于，所述步骤(3)中改良肉汤培养基包括以下组分：酵母粉1‑10g/L，酵母蛋白胨1‑10g/L，葡萄糖5‑15g/L，KH2PO41‑3g/L，MgSO4·7H2O1‑2/L，番茄浸出粉1‑5g/L，吐温800.5‑1.0g/L，硫酸亚铁0.05‑0.15g/L，硫酸锰0.05‑0.15g/L，生物素0.01‑0.1g/L，VB120.01‑0.5g/L，烟酰胺0.01‑0.5g/L，盐酸硫铵0.01‑0.1g/L，pH＝5.5‑6.0。4.如权利要求2所述的高密度培养方法，其特征在于，所述步骤(3)中培养方法为：按照通气量1：0.01通入无菌空气，保持罐压0.01‑0.02Mpa。5.一种包含如权利要求1所述的嗜酸乳杆菌LS001的发酵制品。6.一种如权利要求5所述的发酵制品的制备方法，其特征在于，制备步骤如下：(1)收集菌体将高密度的嗜酸乳杆菌LS001发酵液通过微滤膜进行过滤处理，当浓缩1‑5倍时，加入等体积的纯化水，再进行过滤浓缩；直至滤出液的电导率≤2s/m，浓缩1‑5倍后收集菌体；(2)配料根据步骤(1)浓缩液中嗜酸乳杆菌LS001的菌体数量，添加等量的其他类型的益生菌和干燥保护剂，搅拌均匀，使物料维持10‑15℃；(3)干燥将复配液均匀的平铺在真空低温连续带式干燥机的干燥带上，控制温度25℃‑30℃进行真空干燥；(4)粉碎、包装收集干燥后的物料，用粉碎机进行粉碎，粉碎过程控制温度≤30℃；按照产品类型进行无菌包装。7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中的益生菌为鼠李糖乳杆2CN115975858A权利要求书2/2页菌GS014；所述鼠李糖乳杆菌(lactobacillusrhamnosus)GS014，其在中国微生物菌种保藏管理委