预览加载中,请您耐心等待几秒...
1/10
2/10
3/10
4/10
5/10
6/10
7/10
8/10
9/10
10/10

亲,该文档总共15页,到这已经超出免费预览范围,如果喜欢就直接下载吧~

如果您无法下载资料,请参考说明:

1、部分资料下载需要金币,请确保您的账户上有足够的金币

2、已购买过的文档,再次下载不重复扣费

3、资料包下载后请先用软件解压,在使用对应软件打开

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CN104419004A(43)申请公布日(43)申请公布日2015.03.18(21)申请号201310390436.1(22)申请日2013.08.30(71)申请人中国科学院深圳先进技术研究院地址518055广东省深圳市南山区西丽大学城学苑大道1068号(72)发明人王志勇谢丽斯刘新郑海荣(74)专利代理机构广州华进联合专利商标代理有限公司44224代理人吴平(51)Int.Cl.C08G73/04(2006.01)C12N15/87(2006.01)C12N15/85(2006.01)C12N5/07(2010.01)权利要求书2页说明书9页附图3页(54)发明名称改性聚乙烯亚胺及其制备方法和基因转染试剂及其应用(57)摘要本发明涉及一种改性聚乙烯亚胺及其制备方法和基因转染试剂及其应用。该改性聚乙烯亚胺包括作为主链的聚乙烯亚胺以及接枝在所述聚乙烯亚胺上的ε-己内酯,所述ε-己内酯与所述聚乙烯亚胺的伯胺氨基或仲胺氨基配位开环接枝,且未发生ε-己内酯的配位开环聚合反应。经实验表明,这种结构的改性聚乙烯亚胺的基因转染率较高,其基因转染率是远高于现有市场产品支化聚乙烯亚胺以及脂质体2000,并且与重均分子量为25000g/mol支化聚乙烯亚胺相比未观测到明显的细胞毒性。因此,上述改性聚乙烯亚胺可被视为优良的基因递送系统。CN104419004ACN104419004A权利要求书1/2页1.一种改性聚乙烯亚胺,其特征在于,包括作为主链的聚乙烯亚胺以及接枝在所述聚乙烯亚胺上的ε-己内酯;所述ε-己内酯与所述聚乙烯亚胺的伯胺氨基或仲胺氨基配位开环接枝,且未发生ε-己内酯的配位开环聚合反应。2.根据权利要求1所述的改性聚乙烯亚胺,其特征在于,所述聚乙烯亚胺的重均分子量为600g/mol~75000g/mol。3.根据权利要求1所述的改性聚乙烯亚胺,其特征在于,所述改性聚乙烯亚胺的结构式如下所示:其中x、y、z为非负整数,并且x、y和z均不为零,14≤x+y≤1744。4.根据权利要求1所述的改性聚乙烯亚胺,其特征在于,所述改性聚乙烯亚胺的结构式如下所示:其中,x、y为非负整数,并且x和y均不为零,14≤x+y≤1744。5.一种改性聚乙烯亚胺的制备方法,包括如下步骤:按质量比为1:0.01~2.7将聚乙烯亚胺和ε-己内酯加入溶剂中,并加入催化剂得到混合物,将所述混合物于15℃~35℃下搅拌5分钟~30分钟,然后加热到沸腾,搅拌24小时~72小时,分离纯化得到所述改性聚乙烯亚胺,所述改性聚乙烯亚胺包括作为主链的聚乙烯亚胺以及接枝在所述聚乙烯亚胺上的ε-己内酯;所述ε-己内酯与所述聚乙烯亚胺的伯胺氨基或仲胺氨基配位开环接枝,且未发生ε-己内酯的配位开环聚合反应。6.根据权利要求5所述的改性聚乙烯亚胺的制备方法,其特征在于,所述溶剂为无水三氯甲烷。7.根据权利要求5所述的改性聚乙烯亚胺的制备方法,其特征在于,所述聚乙烯亚胺与所述溶剂的质量比为1:10~200。8.根据权利要求5所述的改性聚乙烯亚胺的制备方法,其特征在于,所述催化剂为异辛酸亚锡。9.根据权利要求5所述的改性聚乙烯亚胺的制备方法,其特征在于,所述聚乙烯亚胺与所述催化剂的质量比为1:0.0005~0.01。2CN104419004A权利要求书2/2页10.根据权利要求5所述的改性聚乙烯亚胺的制备方法,其特征在于,所述分离纯化的方法具体为:将所述搅拌24小时~72小时得到的反应物进行过滤,取滤渣溶于甲醇溶液中,在室温及搅拌条件下滴加无水乙醚,离心或过滤,收集沉淀,所述沉淀为改性聚乙烯亚胺。11.一种基因转染试剂,其特征在于,包括溶剂及溶解于所述溶剂中的如权利要求1~4任一项所述的改性聚乙烯亚胺。12.根据权利要求11所述的基因转染试剂,其特征在于,所述改性聚乙烯亚胺和溶剂的质量比为1~10:50~500。13.一种如权利要求11或权利要求12所述的基因转染试剂在递送脱氧核糖核酸、质粒DNA、核糖核酸或功能蛋白质中的应用。3CN104419004A说明书1/9页改性聚乙烯亚胺及其制备方法和基因转染试剂及其应用技术领域[0001]本发明涉及基因转染生物技术领域,特别是涉及一种改性聚乙烯亚胺及其制备方法和基因转染试剂及其应用。背景技术[0002]基因治疗(genetherapy)和基因修饰(genemodification)是指将外源性功能基因导入靶细胞,以纠正、补偿或修饰生物体原有基因序列,改变基因表达功能,以满足实验需求和疾病治疗的目的。但是,外源性基因不能自行有效进入靶细胞,需要借助基因递送系统才能实现基因表达。作为承载基因的工具,基因递送系统能够将目的基因送入靶细胞内,从而发挥目的基因的特