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本实用新型提供一种具有抗干扰作用的25?羟基维生素D3测定试剂盒,具体涉及羟基维生素D技术领域,包括试剂盒,所述试剂盒上方设置有防干扰机构,所述防干扰机构包括滑轨、滑轮、连接块、弹簧、防护盖、限位槽、限位杆、滑槽、滑块和延长杆。该具有抗干扰作用的25?羟基维生素D3测定试剂盒,在试剂盒对25?羟基维生素D3进行测定时,可以先将防护盖拉动,在滑轨与滑轮的相互作用下,利用滑轮带动防护盖进行移动,进而使得防护盖可以滑动到试剂盒两侧,且利用弹簧的回弹性,在试剂盒遭受到外界其他物体碰撞挤压时,可以对试剂盒起到缓冲的效果,避免外界物体干扰到25?羟基维生素D3试剂的使用,再将限位杆塞入限位槽内部,可以对防护盖进行固定。