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本发明属于药物合成技术领域,具体涉及一种曲氟尿苷杂质化合物及其制备方法。本发明是以1?((2S,4S,5R)?4?乙酰氧基?5?(乙酰氧基甲基)四氢呋喃?2?基)?2,4?二氧?1,2,3,4?四氢嘧啶?5?羧酸为原料在Novozyme435的作用与曲氟尿苷的糖基5?位的羟基酯化后脱掉糖基上羟基保护基制得曲氟尿苷杂质化合物。本发明提供的合成方法简单,且该方法所得曲氟尿苷杂质化合物经重结晶析出纯度高,收率高,该杂质化合物可作为曲氟尿苷成品检测标准中的杂质对照品。