紫外可见吸光光度法.ppt

第8章紫外可见吸光光度法及分子荧光分析法化学分析：常量组分(>1%),Er:0.1%～0.2%依据化学反应,使用玻璃仪器仪器分析方法分类分子光谱学光声光谱法(PAS)PhotoAcousticSpectroscopy拉曼光谱法(RS)RamanSpectroscopy*核磁共振波谱法(NMR)NuclearMagneticResonanceSpectroscopy*质谱法(MS)MassSpectroscopy发展联用技术是趋势!8.1吸光光度法的基本原理I08.1.1光的基本性质(电磁波的波粒二象性)Xh－普朗克(Planck)常数6.626×10-34J·s－频率E－光量子具有的能量单位：J(焦耳)，eV(电子伏特)1eV=1.602×10－19J结论:一定波长的光具有一定的能量，波长越长(频率越低)，光量子的能量越低.单色光：具有相同能量(相同波长)的光.混合光：具有不同能量(不同波长)的光复合在一起.例如白光.电磁波谱及分析方法光学光谱区8.1.2物质对光的吸收与发射S2光谱种类/nm熔融石英Cr2O72-、MnO4-的吸收光谱苯和甲苯在环己烷中的吸收光谱不同物质吸收光谱的形状以及max不同——定性分析的基础同一物质，浓度不同时，吸收光谱的形状相同，Amax不同——定量分析的基础8.1.3光吸收基本定律:朗伯-比尔定律朗伯-比尔定律透光率(透射比）T（Transmittance）吸光度A、透射比T与浓度c的关系K吸光系数Absorptivity吸光度与光程的关系A=abc吸光度与浓度的关系A=abc吸光度与波长的关系A=abc朗伯-比尔定律的适用条件溶液浓度的测定8.1.4吸光度的加和性与吸光度的测量8.2光度分析的方法和仪器2.光电比色法滤光片3.吸光光度法和分光光度计分光光度计的主要部件氙灯单色器：将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置。光栅：在镀铝的玻璃表面刻有数量很大的等宽度等间距条痕(600、1200、2400条/mm)。利用光通过光栅时发生衍射和干涉现象而分光。吸收池(比色皿)：用于盛待测及参比溶液。可见光区：光学玻璃池紫外区：石英池硒光电池（Barrier-layerphotocell）光电管(Phototube)光电倍增管(PhotomultiplierTube,PMT)722型分光光度计吸光光度法仪器主要差异比较1.单光束分光光度计2.双光束分光光度计多通道仪器（MultichannelInstruments）光电二极管阵列(通常具有316个硅二极管)photodiodearrays(PDAs)同时测量200～820nm范围内的整个光谱,比单个检测器快316倍,信噪比增加3161/2倍.HP8452A多通道二极管阵列分光光度计镀铝反射镜纤维光度计习题