帕歌斯对EAE大鼠脊髓中NFP及CCL5表达的影响.doc

帕歌斯对EAE大鼠脊髓中NFP及CCL5表达的影响目的：观察药物帕歌斯（Pagosid,PGS）的干预对实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimentalautoimmuneencephalomyelitis,EAE）大鼠脊髓中神经丝蛋白（neurofilamentprotein，NFP）及CCL5（CCChemokineLigand5）表达的影响，探讨其对EAE是否有神经保护作用及可能的作用机制，为MS的临床治疗提供新思路和实验依据。方法：78只成年雌性Wistar大鼠随机分为5组：正常组（N组）、免疫诱导组（EAE组）、免疫诱导组+小剂量PGS组（LPGS组）、免疫诱导组+大剂量PGS组（HPGS组）、免疫诱导组+激素组（PAT组）。使用自制完全免疫抗原（GPSCH-CAF）诱导EAE模型。N组不作任何处理，EAE组造模后不予给药，LPGS组、HPGS组分别予以PGS20mg/kg·d、100mg/kg·d灌胃，PAT组予以醋酸泼尼松8mg/kg·d灌胃。比较各组大鼠的发病率并进行神经功能评分，并分别于第7天、第14天、第21天处死后取脊髓行Bielschowsky银染色、NFP及CCL5免疫组化染色。结果：1.各组实验大鼠的发病率：EAE组发病率为88.89%；PGS干预组及PAT干预组发病率较EAE组降低（P<0.05）；HPGS组发病率较LPGS组低（P<0.05）。2.神经功能评分：在免疫诱导后第7天、第14天、第21天分别予以评分，在第14、21天，LPGS组、HPGS组及PAT组神经功能评分均低于EAE组；第14天HPGS组、PAT组神经功能评分低于LPGS组（P<0.05）；三个时间点来比较，7天组、21天组与14天组比较，差异有统计学意义（P<0.05），而7天组与21天组比较没有统计学意义（P>0.05）。3.组织病理学：Bielschowsky银染色示N组轴索大多走形方向一致，结构紧密，连续性好，粗细较均匀，其余各组都不同程度地出现轴索改变，如结构紊乱，连续性破坏，空泡样缺失、断裂。4.免疫组织化学染色：4.1大鼠脊髓中NFP的表达：染色结果示五组均有NFP阳性表达，其中N组表达最多；EAE组NFP阳性表达较同期N组明显减少，而HPGS组、LPGS组、PAT组药物干预后，NFP阳性表达神经元数较同期EAE组增多，且差异有统计学意义（P<0.05）；三个时间点比较，7天组、21天组与14天组比较，差异有统计学意义（P<0.05），而7天组与21天组比较没有统计学意义（P>0.05）。4.2大鼠脊髓中CCL5的表达：染色结果示除N组外，其余四组均有CCL5阳性表达，其中EAE组CCL5阳性表达较同期其他组明显增多；药物干预组CCL5阳性表达量有所减少，且HPGS组、PAT组CCL5表达量较同期LPGS组为低，差异有统计学意义（P<0.05）；三个时间点比较，7天组、21天组与14天组比较，差异有统计学意义（P<0.05），而7天组与21天组比较没有统计学意义（P>0.05）。结论：1.帕歌斯的干预可减低EAE大鼠的发病率，改善其轴索损伤程度；其干预效应与剂量有关。2.帕歌斯的干预对EAE大鼠的神经保护作用机制可能与上调NFP、下调CCL5有关。