竹荪多糖提取工艺的优化及其体外抗氧化活性的研究.doc

竹荪多糖提取工艺的优化及其体外抗氧化活性的研究竹荪多糖是食药两用植物竹荪中的主要生物活性成分，具有很高的开发及利用价值。为了提高竹荪多糖的收率，开发高效、节时的浸提新工艺，本文利用Box-Behnken设计的响应面法，对竹荪菌柄多糖的复合酶浸提工艺进行了工艺优化研究，并与传统的热水浸提法进行了比较。本文采用两种提取方法分别得到竹荪菌柄及菌裙多糖，并对其分别进行红外和透射电子显微镜表征，利用DPPH·和O^2-·自由基清除实验及还原能力的测试实验这三种方法，研究了不同竹荪多糖的体外抗氧化活性。通过复合酶浸提工艺对竹荪菌柄多糖进行提取，利用响应面法优化该工艺的提取条件，得到最佳工艺条件为：纤维素酶、木瓜蛋白酶及果胶酶浓度分别为2.0%、2.0%和1.5%，浸提时间、温度和pH分别为105min、52.5°C和5.25。在此条件下，竹荪多糖达到最大得率为9.77%。通过对竹荪多糖进行表征分析，研究不同提取方法对竹荪多糖结构和形貌的影响。表征结果表明：酶法提取多糖的红外图谱较热水提取多糖在氢键、吡喃糖苷及羰基等处均表现出更强的吸收峰；从多糖的透射电子显微镜图谱可知，酶法提取多糖较热水提取多糖的分子颗粒要大。表征结果证实了酶提取法的优势。通过对竹荪多糖进行DPPH·和O^2-·自由基清除及还原能力的测试，以对比不同竹荪多糖的体外抗氧化活性。DPPH·和O^2-·自由基清除及还原能力的测试结果表明：酶法提取多糖的抗氧化活性均优于热水提取多糖的抗氧化活性，并以酶法提取所得竹荪菌裙多糖的抗氧化活性为最好：该多糖浓度为1.0mg/mL时，对DPPH·自由基的清除率可达86.94%；在700nm处的吸光度值可达0.387；浓度为2.0mg/mL时，对O^2-·自由基的清除率为33.41%。相较而言，竹荪多糖具有较强的DPPH·自由基的清除能力和还原能力，但其对O^2-·自由基的清除能力相对较弱。本文研究表明，复合酶浸提工艺不仅能够提高多糖收率及效率，同时也保护了多糖的结构及生物活性。