洋葱多糖的提取工艺及其抗氧化活性研究.doc

洋葱多糖的提取工艺及其抗氧化活性研究摘要对洋葱多糖提取的最适工艺条件、洋葱多糖脱蛋白方法及其抗氧化活性进行了研究。结果表明提取洋葱多糖的工艺条件为：提取时间5h提取温度80℃料液比1：25。洋葱多糖的最佳脱蛋白方法为胰蛋白酶+Sevag法。洋葱多糖具有较强的还原力对超氧阴离子自由基、羟基自由基均表现出较好的清除能力且在一定范围内对二者的清除作用呈现良好的量效关系。关键词洋葱多糖提取抗氧化StudyontheExtractionandAntioxidantActivityofOnionPolysaccharideAbstractTheoptimumextractionprocessandoptimummethodofremovingproteinandantioxidantactivityofonionpolysaccharidewasinvestigatedinthispaper．Theresultsshowedthattheoptimumextractionconditionwasextractingtime5h．extractingtemperature80℃andthesolidtoliquidratioof1：25．Theoptimummethodofremovingproteinofonionpolysaccharidewastypsincombinedwithsevagmethod．Theonionpolysaccharidehadstrongreducingpowerandscavengingratewaslinerwithitsconcentrationtoacertainextent．Keywordsonionpolysaccharideextractionantioxidation目录1材料与方法11.1实验材料与试剂11.2仪器11.3试验方法11.3.1洋葱多糖的提取工艺11.3.2洋葱多糖提取工艺的正交试验设计21.3.3洋葱多糖及蛋白质含量的测定21.3.4脱蛋白方法的优选21.3.5洋葱多糖的鉴定31.3.6洋葱多糖抗氧化活性的测定32结果与分析32.1洋葱多糖提取的正交试验结果与分析32.2脱蛋白方法的探讨42.3多糖鉴定结果42.4抗氧化测定结果52.4.1洋葱多糖对超氧阴离子自由基的清除效果52.4.2洋葱多糖对羟基自由基的清除效果52.4.3洋葱多糖还原能力的测定结果63结论6洋葱(AlliumcepaL)为百合科(Liliaceae)葱属(Allium)植物近代医学研究发现洋葱含有硫化物、类黄酮、苯丙素酚类、甾体皂苷类、含氯化合物、前列腺素类和多糖等多种化学成分具有消炎抑菌、防癌抗癌、利尿止泻及降血糖、降血脂、降胆固醇、降血压、抗血小板凝聚、预防心脑血管病、抗氧化、美容等多种药理作用。目前对洋葱中活性成分的研究还主要集中在含硫化合物上对洋葱多糖的研究很少国内在此方面的研究更少。多糖是一类广泛存在于动植物、微生物细胞中重要的生物大分子物质。随着分子生物学研究的进展人们逐渐发现不同来源的多糖具有广泛而复杂的生物学活性已引起医药界的高度重视并成为当今生命科学研究的热点之一。本实验以热水浸提、乙醇沉淀的方法从洋葱中提取多糖为进一步开发洋葱的保健作用提供理论依据。1材料与方法1.1实验材料与试剂新鲜洋葱购于凤阳县农贸市场；无水乙醇上海振企化学试剂有限公司；苯酚国药集团化学试剂有限公司；葡萄糖中国医药集团上海化学试剂公司；1-一萘酚中国医药集团上海化学试剂公司；NBT国药集团化学试剂有限公司；L一甲硫氨基酸国药集团化学试剂有限公司；硫代巴比妥酸国药集团化学试剂有限公司；核黄素中国医药集团上海化学试剂公司；FeSO4中国医药集团上海化学试剂公司。1.2仪器HH-4水浴锅国华电器有限公司；TDL一5离心机上海安亭科学仪器厂；Phs一3C精密pH计上海精密科学仪器有限公司；UV一3501紫外一可见分光光度计天津港东科技发展有限公司。1.3试验方法1.3.1洋葱多糖的提取工艺残渣加去离子水→水浴→抽滤→滤液旋转蒸发浓缩Sevag法去蛋白→糖液中加入4倍无水乙醇→静置过夜→4200r／min离心20min→残渣中倒入无水乙醇搅拌→4200r／min离心2Omin残渣中加入丙酮搅拌→420Or／min离心20min→残渣在40℃温度下烘干→洋葱多糖粗品1.3.2洋葱多糖提取工艺的正交试验设计已有的研究结果表明影响多糖提取得率的主要因素有：温度、时间、液料比等。根据预