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本发明提供了一种防眩光组合物、防眩膜及其制备方法和应用。所述防眩光组合物包括光固化预聚物、硅氧化物微粒、纤维素化合物。所述纤维素化合物的平均分子量为10000~80000g/mol;所述羟基的质量含量与所述纤维化合物的质量比例不高于5%;所述硅氧化物微粒的平均直径为1~5μm。由于防眩光组合物中的纤维素化合物可以使硅氧化物微粒更均匀地分散于防眩层,且防眩层的厚度相对于硅氧化物微粒的平均直径的比例为80~95%,所以在防眩层产生了与表面凹凸形状对应的膜厚差,同时硅氧化物微粒在防眩层中呈单粒子层排列分布。在本发明的防眩膜中,层压在透明基材一面的防眩层在保持优秀防眩性的同时,还具有防止干涉条纹、白浊、表面闪烁等优点。