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本发明涉及生物材料技术领域,具体公开了一种血液促凝剂及其制备方法和应用。该血液促凝剂包括纳米二氧化硅、乙烯基吡咯烷酮?醋酸乙烯酯共聚物、聚乙二醇硬脂酸酯和溶剂;其中,纳米二氧化硅:乙烯基吡咯烷酮?醋酸乙烯酯共聚物:聚乙二醇硬脂酸酯的质量比为1?5:1:1?10。本发明制备得到的血液促凝剂凝血时间短、获得的血清质量高;能进行辐照灭菌,且经辐照灭菌和老化等处理后的产品均与处理前的产品性能相当;有效期延长至1年的同时不影响产品性能,存放过程中无沉降、结块现象;能够满足临床上检测的需要。