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本发明公开了一种采用K562细胞扩增NK细胞的方法,包括如下步骤:采用重组慢病毒对K562细胞进行感染,感染时间为10?20h,通过流式细胞术和有限稀释法进行克隆得到工程细胞株;然后采用钴?60辐照灭菌得到滋养细胞;采用外周血分离单个核细胞,然后加入至NK细胞完全培养基中重悬,加入滋养细胞混合均匀,置于37℃、二氧化碳浓度为2?6%的培养箱中培养;培养至第3天时,离心弃掉上清液,加入相同体积的NK细胞完全培养基混合均匀,继续置于37℃、二氧化碳浓度为2?6%的培养箱中培养;培养至第7天,补加1?2μg/mLIFN?γ和自体血浆;继续培养至第14天得到采用K562细胞扩增的NK细胞。