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本发明公开了一种利用虎奶菇生物合成纳米硒的方法,属于生物技术领域。本发明是虎奶菇菌丝体发酵到一定时间后,在发酵培养基中加入不同浓度的Se(IV),继续进行发酵,最终在菌体和胞外生物合成纳米硒颗粒。本发明的方法条件温和,工艺简单,环境友好,易于实现,具有潜在的工业化应用前景。