盐酸二甲双胍片的含量测定方案.docx

盐酸二甲双胍片的含量测定方案一、设计背景糖尿病（diabotesmellitus，DM）是以血糖和尿糖增高为主要特征的代谢综合征，患病率在世界各国都在迅速增长，据国际糖尿病联合会最新公布的数字，目前全球糖尿病患者为2.46亿人，到2025年这一数字预计将增至3.8亿，我国糖尿病人数居全球第二。目前，2型糖尿病的临床治疗在饮食疗法和运动疗法无效的情况下仍以药物治疗为主，其中口服降糖药起着不可忽视的作用。盐酸二甲双胍片降血糖疗效非常好,安全性也很高。是一种既安全又有效的双胍类降血糖的药品,现已广泛应用于治疗2型糖尿病。由于它的价格明显低于进口的同类药品,从而使得大多数的糖尿病人能够承受得起。盐酸二甲双胍片用于单纯饮食控制不满意的2型糖尿病人，特别是肥胖以及伴高胰岛素血症者，用本药不但有降血糖作用，还有减轻体重和高胰岛素血症的效果。对某些磺酰脲类疗效差的患者可以发挥一定的治疗效果，如与磺酰脲类、小肠糖苷酶抑制剂或噻唑烷二酮类降糖药联合用药，会比分别单用的效果更好。还可以用于胰岛素治疗的患者，以减少胰岛素用量。二、设计依据盐酸二甲双胍片中主要成分是盐酸二甲双胍，其化学名称为：1，1-二甲基双胍盐酸盐。通过查询文献资料可知，目前《中国药典》（2020年版）第二部采用紫外-可见分光光度法测定盐酸二甲双胍片的含量。这种方法受辅料的影响,测定准确度偏低、精密度也较差。本方案采用了高效液相色谱法测定盐酸二甲双胍片的含量,高效液相色谱法具有强大的分离功能，可分离的同时还可以分离其他相关杂质，采用六通阀进样重复性好，误差相对较小，定量分析准确度高，有利于制剂的质量控制与评价。三、设计方案（一）仪器与试剂1.仪器（1）高效液相色谱仪（日本岛津）；（2）电子分析天平（瑞士梅特勒-托利多公司，XS105型）；（3）超声波清洗器(上海科导超声仪器有限公司，型号为SK2510HP)。2.试剂（1）盐酸二甲双胍对照品（中国食品药品检定研究院，标示量为99.9%）、（2）盐酸二甲双胍片（3）甲醇、乙腈为色谱纯（3）试验用水为纯化水及超纯水、其他化学试剂均为分析纯（二）测定方法1.色谱条件（1）色谱柱：C18柱（250mm×4.6mm,5μm）（2）流动相：0.01mol/L磷酸二氢钠溶液(用磷酸调pH至3.5)-甲醇(80:20)（3）检测波长：根据试验选出最大吸收波长（233nm）作为检测波长（4）进样量：20μl（5）流速：1.0ml/min2.溶液的制备（1）对照品溶液的制备用上述电子分析天平，精密称取在105℃干燥2h后，置于干燥器中放冷至室温的盐酸二甲双胍对照品约100mg，精密称定，置于100mL的容量瓶中，加流动相20mL，置超声仪中超声震荡5min，使药物充分溶解，再加流动相稀释至刻度，摇匀，静置，即得每毫升中约含对照品1mg的二甲双胍对照品溶液。（2）供试品溶液的制备取盐酸二甲双胍片20片，用上述电子分析天平精密称定，再研成细粉，取少量，精密称取(约相当于盐酸二甲双胍100mg)，置于100ml容量瓶中，加流动相30mL，放入超声仪中，超声震荡5min，使药物充分溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀。过滤，弃去初滤液，取续滤液。精密吸取续滤液1mL置于50mL的容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，静置，即得供试品溶液。3.方法学考察（1）专属性试验分别吸取“对照品溶液的制备”项下的对照品溶液和“供试品溶液的配制”项下的供试品溶液10μL，按上述色谱条件，依次注入高效液相色谱仪中，进样后，分别记录色谱图，对照品溶液色谱图中只有单一的色谱峰，供试品溶液色谱图中的色谱峰分离良好，无干扰，且两谱图中保留时间一致，则认为本法专属性良好。（4）线性关系分别精密量取“对照品溶液的制备”项下的对照品溶液0.5mL，1.0mL，2.0mL，4.0mL，7mL，分别置于10mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为不同浓度对照品溶液。取上述5个不同浓度的对照品溶液各10μL，依次注入液相色谱仪，依法测定，分别记录不同浓度下的盐酸二甲双胍的色谱峰峰面积，再以峰面积（A）为纵坐标，对照品溶液浓度（C）为横坐标，绘制标准曲线。写出线性回归方程及相关系数r。根据回归方程，判断线性关系是否良好。（5）精密度试验精密移取“对照品溶液的制备”项下的对照品溶液10μL,注入液相色谱仪，在同一实验条件下连续进样6次，记录色谱图，分别记录盐酸二甲双胍峰面积，计算其平均值及RSD值。（6）回收率试验取盐酸二甲双胍片供试品溶液适量，配制6份，分别精密移取盐酸二甲双胍对照品溶液1ml（约20μg/ml）加入至每份样中，按照上述色谱条件，各自移取10μL，注入液相色谱仪，分别记录色谱图，并按峰面积计算回收率。（7）重复性试验取同一批样品，按照“供试品溶液的制备”中的方法制备供试品6份，按照上述色