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乳铁蛋白乳铁蛋白不仅参与铁的转运而且具有广谱抗菌、抗氧化、抗癌、调节免疫系统等强大生物功能被认为是一种新型抗菌、抗癌药物和极具开发潜力的食品和饲料添加剂。乳铁蛋白广泛分布于哺乳动物乳汁和其他多种组织及其分泌液中〔包括泪液、精液、胆汁、滑膜液等内、外分泌液和嗜中性粒细胞人乳中乳铁蛋白浓度约为1.0-3.2mg/ml是牛乳中的10倍〔牛乳中含量为0.02-0.35mg/ml〕占普通母乳总蛋白的20%。血液中乳铁蛋白主要来自中性白细胞骨髓、子宫内膜及胎盘等也能分泌少量的乳铁蛋白进入血液。第五页共二十八页。人在泌乳期间乳铁蛋白含量随着泌乳时间的不同而发生变化如人初乳中乳铁蛋白可达6-14mg/ml常乳期降至1mg/ml。乳铁蛋白由700个左右的氨基酸组成。人乳铁蛋白分子量为82.4KDa有692个氨基酸残基;牛乳铁蛋白分子量为83.1KDa由689个氨基酸组成。在晶体结构中Phe17~Leu29间肽链形成α-螺旋结构Ser33~Arg39间无规那么卷曲结构并使一个平行β-折叠结构与N端相连。Phe17~Leu29间肽段具有较强的抗菌活性如果将其a-螺旋变成β-折叠结构抗菌活性有较大提高可能是由于β-折叠结构易于细菌外表接触的缘故。乳铁蛋白对胰蛋白酶类具有很强的抗降解能力尤其是结合铁离子后抗降解能力增强因此在肠道内不易被降解能以完整分子的形式被吸收。这种抗蛋白酶水解的特性可能与糖基化有关。根据Lf结合Fe的多寡可将其分为缺铁型乳铁蛋白(apoLf)、铁半饱和型乳铁蛋白和铁饱和型乳铁蛋白(Holoix)三种形式。不同形式的Lf具有不同的抗变性能力其抗巴氏杀菌热变性能力依次为:Holoix>铁半饱和型乳铁蛋白>apoLf。1、乳铁蛋白具有广谱抗菌作用首先Lf对革兰氏阴性菌和阳性菌的抑菌作用是由于乳铁蛋白高度结合铁使细菌失去生长所需的根本元素铁;其次Lf通过氨基末端强阳离子结合区域增加细菌细胞膜的通透性使细菌的脂多糖从外膜渗出达到直接杀菌作用;另外Lf可通过水解得到的抗菌肽来实现抗菌作用。将Lf通过蛋白酶水解获得一些低分子量的肽这些肽的抗菌活性大幅度增强可抑制G+和G-菌生长其中包括一些对Lf具有抵抗性的菌株。2、乳铁蛋白具有抗病毒作用3、乳铁蛋白具有抗氧化作用4、乳铁蛋白具有抗癌作用5、乳铁蛋白调节机体免疫反应6、乳铁蛋白调节胃肠道铁的吸收7、乳铁蛋白同药物的协同作用第十九页共二十八页。影响Lf功能的因素乳铁蛋白的生产制备方法Lf的别离纯化及检测方法反相高效液相色谱法测定牛初乳中乳铁蛋白含量精密称取乳铁蛋白标准品1mg配制浓度分别为1、0.5、0.25、0.125、0.05、0.025mg/mL的对照品溶液。取样品进行RP-HPLC检测。如图3所示为离子交换层析后收集各洗脱峰其中峰1、2为未吸附蛋白流穿液峰3为低盐浓度洗脱液峰4为高盐浓度洗脱液即提取的乳铁蛋白洗脱液。图4为峰4洗脱液经RP-HPLC检测结果。结果显示牛初乳经除脂肪、除酪蛋白、超滤和离子交换层析后提取的乳铁蛋白的平均纯度为92.23%RSD为1.3%。作为一种高效补铁组分Lf可用作食品添加剂以改变婴幼儿及孕妇普遍缺铁的现状也可制成含铁饮料或补铁胶囊用来提高造血功能改善贫血。在食品或乳制品(如婴幼儿奶粉)甚至口香糖中添加Lf可调节免疫功能。国外在乳制品中补充益生菌和Lf制成片剂或速溶饮料作为运发动的营养品。把Lf添加到碳酸饮料、焙烤食品中既具营养价值又可增进消化功能。在肉食生产中可利用Lf抑制产品外表因人手接触等原因而滋生的有害细菌。在玉米油乳化体系及卵磷脂脂质体系中Lf具有抗氧化功能。实验证明Lf可改进大豆油粉末的保质期。总之Lf因其具有多种生理活性功能在乳品、食品、生化、医药、化装品等领域已得到广泛应用其开发前景不可限量内容总结