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选修三知识点专题一基因工程一、工具1、限制酶(1)来源:主要从原核生物中分离纯化而来。(2)作用:识别特定的核苷酸序列并切开相应两个核苷酸之间的磷酸二酯键。(3)结果:产生黏性末端或平末端。2、DNA连接酶常用类型E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶来源大肠杆菌T4噬菌体功能连接黏性末端连接黏性末端和平末端结果恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键载体常用载体:质粒动植物病毒λ噬菌体衍生物等质粒eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(化学本质:双链环状DNA分子,特点\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(能自我复制,有一个至多个限制酶切割位点,有特殊的标记基因))))载体具备的条件条件适应性稳定并能自我复制目的基因稳定存在且数量可扩大有一个至多个限制酶切割位点可携带多个或多种外源基因具有特殊的标记基因(如抗生素抗性基因)便于重组DNA的鉴定和选择对宿主细胞无害不影响宿主细胞的生活(目的基因序列未知)(知道其中的一段目的基因)(较小的,目的基因序列已知)二、基因工程的操作步骤(1)eq\x(\a\al(目的基因的,获取))方法eq\a\vs4\al(\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(①从基因文库中获取,②利用PCR技术扩增,③通过化学方法人工合成)))(2)eq\x(\a\al(基因表达载,体构建))组成eq\a\vs4\al(\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(①目的基因,②标记基因,③终止子,④启动子)))(Ca2+处理)(3)eq\x(\a\al(将目的基因导,入受体细胞))方法eq\a\vs4\al(\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(①植物:农杆菌转化法、基因枪法、,花粉管通道法,②动物:显微注射技术,③微生物:感受态细胞法)))eq\x(\a\al(目的基因的,检测与鉴定))方法补充:比较项目限制酶DNA连接酶DNA聚合酶解旋酶RNA聚合酶作用底物DNA分子DNA分子片段脱氧核苷酸DNA分子核糖核苷酸作用部位磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键碱基对间的氢键磷酸二酯键作用结果形成黏性末端或平末端形成重组DNA分子形成新的DNA分子形成单链DNA分子转录形成RNA专题二细胞工程一、植物组织培养和动物细胞培养项目植物组织培养动物细胞培养理论基础植物细胞全能性细胞增殖培养基类型固体或半固体培养基液体培养基成分水、矿质元素、维生素、蔗糖、氨基酸、琼脂葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、促生长因子、动物血清等取材植物幼嫩部位或花药等动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织过程结果新的组织或植株个体,可以体现全能性新的细胞系或细胞株,不形成个体,不体现全能性目的①植株快速繁殖②脱毒植株的培育③人工种子④生产药物、杀虫剂等⑤转基因植物的培育①蛋白质生物制品的生产②皮肤移植材料的培育③检测有毒物质④生理、病理、药理学研究相同点①两技术手段培养过程中细胞都进行有丝分裂,都是无性繁殖,都可称克隆,都不涉及减数分裂②均为无菌操作,需要适宜的温度、pH等条件二、植物体细胞杂交与动物细胞融合植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性过程细胞A、B原生质体A、B融合的原生质体杂种细胞杂种植株细胞A、B杂交细胞多个相同杂交细胞相关酶纤维素酶和果胶酶胰蛋白酶或胶原蛋白酶融合方法物理法:离心、电激、振动;化学法:聚乙二醇等试剂诱导除物理法和化学法外还可以用灭活的病毒诱导结果杂种植株杂交细胞意义克服了远缘杂交的不亲和性,获得杂种植株突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能三、单克隆抗体原理:细胞膜的流动性单克隆抗体制备中两次筛选的目的:(1)第一次筛选是将未融合的B淋巴细胞、骨髓瘤细胞以及BB融合、瘤瘤融合的细胞通过选择培养基淘汰,筛选出B瘤融合的细胞。(2)第二次筛选是将产生特定抗体的B瘤细胞通过细胞培养用相应抗原检测的办法筛选出来。因为从体内取免疫过的B淋巴细胞时取出很多种,形成的杂交瘤细胞有很多种,所以需筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞。四核移植(课本P48)原理:动物细胞核具有全能性专题三胚胎工程一体内受精和早期胚胎发育1.精子和卵子的发生(1)精子的发生:①场所:睾丸的曲细精管。②时间:初情期→生殖机能衰退。③eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(第一阶段:初级精母细胞的形成(精原细胞发生染色体复制到初级精母细胞),第二阶段:精子细胞的形成(减一,减二),\a\vs4\al(第三阶段:,精子变形)\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(细胞核→精子头的主要部分,高尔基体→头部顶体,中心体→精子尾,线粒体→聚集在尾的基部形成,线粒体鞘))))(2)卵子