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项目一天然植物有效成分提取子项目一、黄芩根中黄芩苷的提取1、【项目目的】(1)掌握黄芩苷不同提取工艺和操作要点,不同工艺对产品得率和品质的影响;(2)通过黄芩苷含量检测,掌握定性、定量方法在黄酮类物质检测中的应用;(3)通过对黄芩苷的单因素和正交实验优化,掌握正交方法在植物有效成分提取中的应用;(4)通过黄芩苷的提取工艺优化实训,掌握黄酮类物质提取的一般规律。2、【项目任务】(1)通过查阅文献,掌握水提法、醇提法在黄芩苷提取中的基本原理;(2)查阅文献设计不同的黄芩苷提取工艺,并结合正交实验进行黄芩苷的提取工艺优化,得到提取得率最大化;(3)查阅文献并结合黄芩苷国标检测方法,对提取中黄芩苷含量进行准确测定;(4)总结黄芩苷提取工艺各环节具体参数,得出最佳工艺条件,并分析存在的问题,各小组以PPT形式作出整体汇报。3、【项目要求】(1)能够全面准确采用单因素实验对可能影响提取得率的因素进行测定分析,同时确定主要影响因素;(2)在单因素的基础上进行正交分析,确定合适的因素和水平设计正交实验;(3)通过正交分析确定最佳提取工艺条件4、【项目背景】(1)黄芩及黄芩苷简介黄芩(ScutellariabaicalensisGeorgi)具有清热燥湿、泻火解毒、止血安胎等功效。其主要成分黄芩苷(Baicalin)是从黄芩根中提取分离出来的一种黄酮类化合物,具有抑菌、利尿、抗炎、抗变态及解痉作用,且具有较强的抗癌反应等生理效能。黄芩苷还能吸收紫外线,清除氧自由基,同时,又能抑制黑色素的生成,是一种很好的功能性美容化妆品原料,具有较高的开发利用前景。黄芩化学成分研究逐渐为药学和化学工作者所重视,目前,国内对黄芩苷提取工艺的研究有较多报道,其提取方法主要有温浸法、煎煮法、微波法、超滤法等,但如何提高黄芩苷收率和纯度一直是实际生产中存在的问题,缺乏对整个工艺条件进行全面研究,因此,有必要对影响黄芩苷提取工艺及其影响因素作一全面探讨。A、水提法黄芩粉碎为20-40目,提取2次,物料比为10和5倍,时间为60min和30min,分离方式为先用双层细滤布过滤再离心分离,60℃用盐酸调pH2—3,再70℃保温60min,静置3h,蒸馏水分离洗涤两次,干燥得黄芩苷粗品,测量黄芩苷的含量,计算提取率。工艺流程原料选择→粉碎→煎煮→过滤→离心→调节Ph值→保温→静置→洗涤→粗制品→加蒸馏水溶解→调节Ph值→加乙醇→调节Ph值→冷却→过滤→干燥→成品。B、回流提取法黄酮苷类(如羟基黄酮、双黄酮、橙酮、查耳酮等)一般可用丙酮、醋酸乙酯、乙醇、水或某些极性较大的混合溶剂进行提取。其中用得最多的是甲醇一水(1:1)或甲醇。乙醇和甲醇是最常用的黄酮类化合物提取溶剂,高浓度的醇(如90%、95%)宜于提取甙元,60%左右浓度的乙醇或甲醇水溶液适宜于提取甙类物质。可以采用一定浓度的醇溶剂提取,测量黄芩苷的含量,计算提取率。C、黄芩苷含量测定方法标准曲线的绘制:精确称取黄芩苷标准品50mg,用50%乙醇溶解并定容于100mL容量瓶,配制0.5mg/mL黄芩苷标液,分别吸取标液0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0,3.5,4.0mL于100mL容量瓶中,用50%乙醇定容,紫外可见分光光度计278nm处测吸光值,得到吸光度-浓度回归曲线。样品含量的测定:精确称取实验所得黄芩苷粗品50mg用50%乙醇溶解定容于100mL容量瓶。用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,吸取续滤液2.5mL于100mL容量瓶中,用50%乙醇定容。另取50%乙醇作空白,于278nm波长处测吸光度,由回归方程式计算出对应浓度,按下式计算黄芩苷含量。黄芩苷含量(%)=[对应浓度(μg/mL)×100×40]/样品重(mg)5、【项目实训流程】(1)在教师指导下,按照材料中所述的参考方法,自行设计并完成黄芩苷提取工艺实训方案;(2)通过正交实验,得出提取得率较高的生产工艺,并确定影响提取的主要因素和影响程度;(3)完成提取工艺总结报告:列表记载提取得率;(4)对不同的提取工艺条件的提取得率进行比较分析,提出提取工艺的最佳条件,简要估算每种工艺对应的加工成本(不含人工费);(5)掌握黄酮类物质提取的一般规律和方法。6、【项目成果形式】(1)黄芩根中黄芩苷类物质提取工艺条件详细设计方案,每小组提交1份;(2)优化后的黄芩苷提取工艺,并列出主要影响因素及影响程度;(3)每小组提供黄芩苷提取实训总结报告1份,并对整个工艺环节作出详细总结和分析;(4)以PPT形式作出汇报,小组成员随机汇报。7、【项目评价考核标准】(1)、考核要求(N+2)A、考核形式分为过程性考核(N)和终结性汇报考核(2),比例为4:6;B、学生出勤率达到75%或以上的要求,否则或不获准参加该科目之考评。C、过程考核主要是对学生的查阅文献并设计生产工艺