菌种的保藏方法.ppt

3菌种保藏的原理和方法菌种保藏的原理理想的菌种保藏方法应具备的条件斜面保藏法穿刺保藏法浸没保藏的操作要点是首先让待保藏菌种在适宜的培养基上生长，然后注入经170℃下灭菌1-2h的矿物油，矿物油的用量以高出培养物1cm为宜。以液体石蜡作为保藏方法时，应对需保藏的菌株预先作试验。因为某些菌株在液体石蜡下生长还十分明显，有些菌株如某些假丝酵母还会同化液体石蜡。所有这些菌株都不能用液体石蜡保藏。为了预防不测，一般保藏株2～3年也应做一次存活试验。沙土管干燥保藏法真空冷冻干燥保藏法悬液保藏法低温保藏法(-20℃)应注意的是经过一次解冻的菌株培养物不宜再用来保藏。保藏过程中应注意控制保藏温度，培养瓶或试管应严格密封。这一方法虽简便易行，但不适宜多数微生物的长期保藏。超低温保藏技术(-60∼-80℃)如果待保藏菌种生长在斜面上，则可用含10％甘油的新配制液体培养基洗涤收获。超低温冰箱的冷冻速度一般控制在1-2℃／min。若干细菌和真菌菌种可通过此保藏方法保藏5年而活力不受影响。液氮冷冻保藏技术基因工程菌的保藏微生物活力和稳定性测定加速保藏试验可用于预测保藏过程中保藏培养物的稳定性。在一个给定温度下通过对高温下短期活力丧失程度检测，预测菌种的稳定性。成功的菌种长期保藏方法之有价值的指标包括在保藏6个月、1年或更长时间后存活百分率(或存活单位)。细胞群体的形态学特征或一些特别的生化特征应在菌种保藏前后保持同一性。1、斜面冰箱保藏法4C；3-6个月2、沙土管保藏法产孢子或芽孢微生物，1年3、菌丝速冻法甘油或二甲基亚砜作为保护剂，-20C4、石蜡油封存法1年左右5、真空冷冻干燥保藏法任何微生物；一般5年以上6、液氮超低温保藏法-196C；保护剂；保存期长国内外重要菌种保藏机构5、普通微生物菌种保藏管理中心（CCGMC）中科院微生物所，北京6、工业微生物菌种保藏管理中心(CICC)轻工部食品发酵工业科学研究所，北京