高产乳酸菌种的选育及其发酵棉粕营养特性的研究-硕士论文.doc

分类号：密级：公开学号：2010108013单位代码：10759石河子大学硕士学位论文高产乳酸菌种的选育及其发酵棉粕营养特性的研究学位申请人吴妍妍指导教师张文举教授申请学位门类级别农学硕士学科、专业名称动物营养与饲料科学向方究研饲料资源的开发与利用院学在所动物科技学院中国新疆石河子2013年5月AStudyonScreeningandBreedingofHigh-yieldLacticAcidBacteriaandthenutritionalcharacteristicsofFermentedCottonseedMealADissertationSubmittedtoShiheziUniversityInPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofAgricultureByYan-YanWu(AnimalNutritionandFeedScience)DissertationSupervisor:Prof.Wen-JuZhangMay，2013Shihezi,Xinjiang,ChinaI要II目的：本研究以嗜酸乳杆菌（Lactobacillusacidophilus）为出发菌种，筛选出高产酸性能的嗜酸乳酸菌，以棉粕和玉米为固体发酵底物，采用所选育菌种进行发酵，研究发酵条件参数、底料组成、接种量的优化以及发酵产物代谢组分和营养价值。并就发酵棉粕对肉仔鸡生长性能、血液理化指标和免疫指标的影响进行了研究。为嗜酸乳杆菌发酵棉粕的综合评定和合理利用提供理论支撑。方法：本研究由四个部分组成。试验一:从S1、W2、J2三株嗜酸乳杆菌中选取一株产乳酸较高、生长较好的菌株，并对该菌株进行自然选育出一株高产乳酸的菌株，并鉴定其为嗜酸乳杆菌。试验二:旨在优化嗜酸乳杆菌发酵棉粕的发酵工艺，采用4因子5水平的正交设计法和二因子有重复观察值相结合的设计方法，通过发酵底物中乳酸含量，确定发酵参数、发酵底料组成和接种比例。试验三：分别采用嗜酸乳杆菌S5、W2、J2按照试验二的优化条件发酵棉粕，分别为对照组、S5组、W2组、J2组共4组，研究发酵产物中有机酸、B族维生素、游离氨基酸含量的变化。试验四：选取1日龄AA肉仔鸡100羽，随机分成2组，每组5个重复，每个重复10羽，对照组添加6%的未发酵棉粕，试验组添加6%的发酵棉粕，研究嗜酸乳杆菌发酵棉粕对AA肉仔鸡生长性能、血液理化指标及免疫指标的影响。结果：试验一：菌株S5在培养36h后其产酸量可达2.14g/L，通过生理生化鉴定和16SDNA全序列分析法确定其种属，然后经过GeneBank基因比对确定同源基因，用DNAMAN软件绘制系统发育树，鉴定为嗜酸乳杆菌（Lactobacillusacidophilus）。试验二：嗜酸乳杆菌发酵棉粕的优化结果为：温度为37℃、时间为48h、底物初水分为30%、初始pH为6、底料组成为棉粕：玉米为9：1；接种量为50mL/kg。试验三：S5组较对照组，戊酸含量极显著提高了49.32%，琥珀酸、柠檬酸显著降低了77.57%、1.93%，VB1、VB2、VB5的含量极显著提高了28.53%、50.91%、89.47%（P<0.01），亮氨酸、赖氨酸含量分别极显著提高了19.84%、33.63%（P<0.01）；W2组较对照组，戊酸、柠檬酸显著提高了79.82%、10.77%（P<0.01），VB1、VB3、VB5极显著降低了19.43%、91.35%、23.52%（P<0.01），亮氨酸、苯丙氨酸含量分别极显著降低了16.64%、4.43%（P<0.01）；J2组较对照组，戊酸、琥珀酸的相对含量极显著提高了127.19%、14.95%（P<0.01），VB1、VB2、VB3、VB5分别极显著降低了44.54%、23.50%、91.47%、23.52%（P<0.01）。试验四：添加嗜酸乳杆菌发酵棉粕后，（1）在0～42日龄，肉鸡平均日采食量、平均日增重分别显著提高了10.20%和15.41%（P<0.05），料重比下降了4.63%（P>0.05）；（2）在0～21日龄，肉鸡血清中白蛋白、总蛋白分别显著提高了10.64%、5.68%（P<0.05），甘油三酯显著提高了23.73%（P<0.05），总胆固醇显著降低了6.72%（P<0.05）；（3）在21～42日龄，肉鸡血清白蛋白提高了2.86%，但差异不显著（P>0.05），总蛋白显著提高了8.14%（P<0.05）；甘油三酯显著提高了9.68%，总胆固醇极显著降低了25.49%（P<0.01）；血清免疫球蛋白IgG、IgA、IgM含量显著提高（P<0.05）。结论：试验一：经过选育，确定了一株产酸性能较好的嗜酸乳杆菌S5。试验二：确定发酵产物中乳酸含量最