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微生物的培养与应用大题精做十一精选大题例:(2018全国卷I)将马铃薯去皮切块,加水煮沸一定时间,过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂,用水定容后灭菌,得到M培养基。回答下列问题:(1)M培养基若用于真菌的筛选,则培养基中应加入链霉素一抑制___________的生长,加入了链霉素的培养基属于___________培养基。(2)M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质,营养物质类型除氮源外还有___________(答出两点即可)。氮源进入细菌后,可参与合成的生物大分子有___________(答出两点即可)。(3)若在M培养基中用淀粉取代蔗糖,接种土壤滤液并培养,平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产生淀粉酶的微生物,加入的显色剂是___________,该方法能筛选出产生淀粉酶微生物的原理。(4)甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量,在同一稀释倍数下得到以下结果:甲同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是110、140和149,取平均值133。乙同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是27、169和176,取平均值124。有人认为这两位同学的结果中,乙同学的结果可信度低,其原因是:。【答案】(1)细菌选择(2)碳源、无机盐蛋白质、DNA、RNA[来源:学#科#网](3)碘液淀粉遇碘显蓝色,产淀粉酶菌落周围淀粉被水解,形成透明圈(4)乙同学的结果中,1个平板的计数与另2个相差悬殊,结果的重复性差【解析】(1)M培养基若用于真菌的筛选,说明M培养基能满足真菌的生长,而能抑制其它微生物的生长,链霉素是一种抗生素,可以抑制细菌的生长。加入了链霉素的培养基能筛选出真菌,该培养基属于选择培养基。(2)微生物生长需要多种营养物质除氮源外,还需要碳源、无机盐、水以及特殊营养物质等。氮元素是蛋白质和核酸等生物大分子的组成元素,因此氮源进入细胞后,可参与合成的生物大分子有蛋白质和核酸。(3)淀粉与碘液会变成蓝色,筛选产淀粉酶的微生物,依据淀粉遇碘液显蓝色,产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解,形成透明圈,再根据透明圈,来筛选产淀粉酶的微生物。(4)乙同学结果不合理,因为1个平板的计数结果与另2个相差悬殊,结果的重复性差,不能简单的用其平均数作为最终结果。模拟精做1.(2019届广东省深圳实验,珠海一中等六校高三第一次联考)硝基苯酚是工业污水中重要污染物,某同学欲从污水处理厂污泥中分离分解硝基苯酚的细菌。请回答下列有关问题:(1)为了筛选污泥中可分解硝基苯酚的细菌,在配置培养基时应选择_______(硝基苯酚,硝基苯酚+牛肉膏,硝基苯酚十葡萄糖)作为碳源,不采用其他两组的原因是。[来源:学*科*网Z*X*X*K](2)纯化菌株时,通常使用的划线工具是__________________。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域的第一条线上无菌落,其它划线上有菌落。分析造成第二划线区域的第一条线无菌落的可能原因是________________(答一点即可)。(3)进行梯度稀释时的一般操作是将1mL菌液移入盛有____mL的无菌水中;常用_______法进行活菌计数,其原理是_____________________,但统计的菌落数往往___________(填“多于”或“少于”)稀释液中的活菌数,原因是__________________________。(4)实验数据显示,当培养基中加入碳源葡萄糖时,该细菌降解速率明显提高,原因可能是。2.(2019届四川省南充市高三第一次诊断性考试)有机磷农药是用于防治植物害虫的含磷有机化合物,广泛应用于农业生产中,有时会造成瓜果蔬菜等食品农药残留超标,不少品种对人、畜的毒性很强,人误食后如不及时医治就会危及生命。某班同学欲从土壤中分离高效降解有机磷农药的微生物。请回答下列问题:(1)为了获得能降解有机磷农药的微生物菌种,可在被有机磷农药污染的土壤中取样,并在含有碳源、氮源及_________等的选择培养基上添加适量的_____________进行选择培养。[来源:学科网ZXXK](2)在制备固体培养基时需加入的常用凝固剂是__________。若培养基需要调节pH,则应在灭菌之_____________(填“前”或“后”)调节。(3)该小组在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间,这样做的目的是。(4)若要测定培养液中选定菌种的菌体数,既可在显微镜下用____________直接计数,也可选用____________________法统计活菌数目。(5)将获得的3种待选微生物菌种甲、乙、丙分别接种在1L含20mg有机磷农药的相同培养液中培养(培养液中其他营养物质充裕、条件适宜),观察从实验开始到微生物停止生长