低温诱导植物染色体数目的变化.docx

第PAGE页码2页/总页数NUMPAGES总页数2页低温诱导植物染色体数目的变化低温诱导植物染色体数目的变化一、实验教学目标1.知识目标：理解低温诱导植物细胞染色体数目变化的作用机制。2.能力目标：学会低温诱导植物染色体数目变化的方法。3.情感态度价值观：体会实验结果带来的成就感，感受团队合作的快乐。二、实验原理进行正常有丝分裂的植物分生组织细胞，在有丝分裂后期，染色体的着丝点分裂，子染色体在纺锤丝的作用下，分别移向两极，最终被平均分配到两个子细胞中去。用低温处理植物分生组织细胞，能够抑制纺锤体的形成，以致影响染色体被拉向两极，使细胞也不能分裂成两个子细胞。结果，植物细胞染色体数目发生变化。三、实验仪器材料洋葱或大葱、蒜、培养皿、滤纸、纱布、烧杯、镊子、剪刀、显微镜、载玻片、盖玻片、冰箱、卡诺氏液、改良苯酚品红染液、体积分数为15%的盐酸溶液、体积分数为95%的酒精溶液。四、实验方法1.培养根尖：将洋葱放在装满清水的广口瓶，让洋葱的底部接触水面。2.低温诱导：待洋葱长出1cm左右的不定根时，将整个装置放入冰箱的低温室（4℃）内，诱导培养36小时。3.固定细胞形态：剪去诱导处理的根尖约0.525px，放入卡诺氏液中浸泡0.51小时，以固定细胞的形态，然后用体积分数约95％的酒精冲洗2次。4.制作装片：取固定好的根尖，进行解离；漂洗；染色；制片4个步骤，具体操作方法与“观察植物细胞的有丝分裂”实验相同。5.观察装片：先用低倍镜寻找染色体形态较好的分裂相。视野中既有正常的二倍体细胞，也有染色体数目发生改变的细胞，发生染色体数目变化的细胞中染色体数目可能为正常细胞的两倍。确认某个细胞发生染色体数目变化后、再用高倍镜观察。6.记录结果：对看到的发生染色体数目加倍的细胞拍照记录。试剂及用途：(1)卡诺氏液：固定细胞形态。(2)95%酒精：冲洗附着在根尖表面的卡诺氏液。(3)解离液：(质量分数为15%HCI和体积分数为95%酒精1:1混合)使组织中的细胞分离开。(4)清水：洗去解离液，防止解离过度，便于染色。(5)改良苯酚品红染液：使染色体着色。五、实验数据的采集分析（一）学生观察到的较好的实验结果后，由老师拍照记录。（二）造成看不到染色体数加倍细胞原因较多，常见原因有：1.没有培养出分生区或没有剪取到分生区2.低温诱导时间不足3.解离不充分或漂洗不干净造成染色不足4.染色时间控制不当，看不清染色体5.没有低倍镜寻找过程六、实验总结反思与修正1.针对新洋葱不容易生根的问题，解决方法为：先将新洋葱放在干燥、通风、阳光下晒10天左右，再放入冰箱中低温室内（4℃左右均可）35天左右，可以解除休眠，就很容易发根了。2.针对剪取根尖时，很多根尖已经被上一个班级的同学剪掉，导致实验失败的问题，解决方法为：每次剪取根尖时先把根从基部剪掉，然后剪取上面的根尖，这样，就可以避免以上问题的出现。3．针对调整解离时间和解离方式的问题。解决方法为：解离时间少于5分钟解离效果不太好，在制作装片时细胞分散效果不好。解离时将根尖放在培养皿的边上，倾斜放置培养皿，滴加1毫升的解离液解离即可，这样用量少，既节约又更加安全。或者在酒精灯火焰上稍微加热，可以节省解离的时间。4.针对染色液的浓度和染色时间的问题，解决方法为：将初始染液稀释10倍，并且染色时间为3分钟，效果最好。如果染色液不稀释，就会把染色体染色太深，以至于在显微镜下观察时，看到的是深蓝的一片，很难分辨一条条的染色体。将染液稀释10倍，并且染色时间减少为3分钟，染色清晰、而且时间长也不影响染色效果。5.压片方法可以改为：将载玻片放在书本上或桌面上，直接用镊子顶端轻轻敲砸盖玻片，使细胞进一步分散开，效果更好，再用吸水纸把周围多余的水吸掉，即可观察。