响应面分析法优化枸杞多糖提取工艺条件.docx

响应面分析法优化枸杞多糖提取工艺条件【摘要】目的利用响应面分析法对枸杞多糖的提取工艺进行优化。方法在单因素实验基础上选取实验因素与水平，根据中心组合实验设计原理采用3因素水平的响应面分析法，依据回归分析确定各工艺条件的影响因子，以多糖提取率为响应值作响应面和等高线。结果在分析各个因素的显着性和交互作用后，得出枸杞多糖水浸提的最佳工艺条件为：料液比1∶32；浸提温度84℃；浸提时间；浸提1次。结论在最佳工艺条件下，枸杞多糖的实际提取率可达%。【关键词】枸杞枸杞多糖提取响应面分析Abstract：ObjectiveTooptimizetheextractiontechnologyofLyciumbarbarumpolysaccharidesbyresponsesurfacefactorsandlevelswerefirstlyselectedbyonefactortests.Onthebasisofthepreviousresultsandaccordingtothecentralcompositeexperimentaldesignprinciples,themethodofResponseSurfaceMethodwith3factorsand3levelswasthefactorsinfluencingthetechnologicalparametersweredeterminedbymeansofregressionsurfaceandcontourwerefinallygraphedwiththeextractionrateastheresponseoptimumconditionsofLyciumbarbarumpolysaccharidesextractionwereasfollows:theratioofmaterialtosolventof1∶32,extractiontemperatureof84℃andextractiontimeofh,onetimeyieldofLyciumbarbarumpolysaccharidesis%undertheoptimumconditions.Keywords：Lyciumbarbarum;Lyciumbarbarumpolysaccharides;Extraction;Responsesurfacemethodology枸杞是多年生灌木，花紫、果红、枝繁叶茂，具有滋补肝肾、益精明目的功效［1］。枸杞子是我国传统中药，具有很高的药食两用价值。近年来，枸杞作为一种新兴的保健型食用植物在我国宁夏、新疆等地区进行了大面积种植，种植面积逐年增加。众多的研究表明，枸杞多糖具有保肝、降血糖、降血脂、抗肿瘤、抗衰老等多种生理功效［2～7］。因此，提取枸杞多糖对开发和利用枸杞资源具有重要意义。响应面分析(ResponseSurfaceMethodology)法系采用多元二次回归方法作为函数估计的工具，将多因子实验中因素与指标的相互关系用多项式近似拟合，依此可对函数的响应面和等高线进行分析，研究因子与响应面之间、因子与因子之间的相互关系。它与过去广为使用的“正交实验设计法”不同，具有实验周期短，求得的回归方程精度高，能研究几种因素间交互作用等优点［8］。笔者在单因素实验的基础上，利用响应面分析法对枸杞多糖提取工艺条件进行了优化。1器材与方法1材料枸杞子、优质工业酒精、苯酚、浓硫酸、蔗糖。2仪器AR-1104电子天平；DKB-501A型超级恒温槽；SHB-11循环水式多用真空泵；TU-1810紫外可见分光光度计。3方法提取方法精确称取枸杞g，置于250ml圆底烧瓶中，加入90%乙醇80ml加热回流1h，残渣用10ml90%乙醇洗涤两次，然后改用蒸馏水回流一定时间，残渣用10ml蒸馏水洗涤两次，滤液于250ml容量瓶中定容，测得多糖含量。枸杞多糖含量及提取率测定标准曲线的绘制：精密称取l05℃下干燥至恒重的葡萄糖g，置100ml容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，配得葡萄糖标准溶液。精密吸取葡萄糖标准溶液，，，，，ml，分别置于10ml容量瓶中，分别加入蒸馏水ml，然后分别再加人ml5%苯酚溶液，摇匀，迅速加入浓硫酸ml，摇匀后置40℃水浴中加热15min，取出置冷水中冷却10min，同时用ml蒸馏水做空白，用分光光度计在波长480nm处测定吸光度，得标准曲线方程：C=2A+6，相关系数r=5。多糖含量与提取率的测定：采用苯酚-硫酸法［9，10］，精密吸取样品溶液1ml置于25ml容量瓶中，并加水稀释定容。然后精密量取1ml，置于10ml容量瓶中，加水2ml,然后再加入5%的苯酚溶液，摇匀，迅速加入浓硫酸ml，摇匀后置40℃水浴中加热15min，取出置冷水中冷却10min，同时用ml蒸馏水做空