大黄素对脓毒症大鼠保护作用的实验研究.docx

大黄素对脓毒症大鼠保护作用的实验研究【摘要】目的探讨大黄素对于脓毒症大鼠的保护作用。方法将健康大鼠随机分为三组，A组：假手术组；B组：盲肠结扎穿刺组；C组：CLP大黄素治疗组。造模72h后分别测定各组血浆肿瘤坏死因子-α、血浆和腹腔白蛋白浓度、肠系膜微静脉流速等并观察肠粘膜损伤程度。结果CLP后大鼠血浆TNF-α浓度、白蛋白渗出率明显升高，而B组升高较C组明显，肠粘膜损伤评分变化也有相同趋势；肠系膜微静脉流速减慢，血浆白蛋白浓度降低，而B组下降较C组明显。结论大黄素能减轻CLP所致脓毒症大鼠的炎症反应和肠粘膜的损伤。【关键词】大黄素脓毒症肿瘤坏死因子-α大鼠【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheprotectiveeffectoftrioxymethylanthraquinonetoratsepsis.MethodsHealthyratsweredividedinto3groups,groupAascontrolgroup;groupBascaecalligationpluspuncturegroupandgroupCastrioxymethylanthraquinonegroup.PlasmaconcentrationsofTNF-α,mesenteriummicrocirculationflowrate,plasmaandperitonealconcentrationsofalbuminweremeasured,pathologicalchangesinintestinalmucosawereobserved72hafteroperation.ResultsTNF-αandratioofplasmaalbuminversusperitonealalbuminwerenotablyincreasedafterCLP,anditwasloweringroupCthaningroupB.LessdamageinintestinalmucosawasobservedingroupCthaningroupB.MesenteriummicrocirculationflowrateandplasmaalbuminweredecreasedafterCLP,andtheywerehigheringroupCthaningroupB.Conclusionstrioxymethylanthraquinonecouldreducetheinflammatoryresponseandextenuatethedamagetointestinalmucosainratsepsis.【Keywords】trioxymethylanthraquinonetumornecrosisfactor-αrat脓毒症是由感染因素引发的全身炎症反应综合征。全球每年发病高达1800000例次，严重的脓毒症死亡率接近30%［１］。其临床特征为继发于各种严重感染的全身高代谢状态、高动力循环状态与过度的炎症反应［2］。本实验采用盲肠结扎穿刺法建立脓毒症大鼠模型，测定比较大鼠血浆肿瘤坏死因子-α、腹腔白蛋白渗出率、肠系膜微静脉流速和肠粘膜损伤病理评分等指标，观察大黄素对脓毒症大鼠的保护作用，并探讨其作用机理。1材料与方法模型制备健康、雄性的Sprague-Dawley(S-D)大鼠30只，体重180-230g，随机分为3组，分别为A组60mg/kg混悬液灌胃给药，2次/d，B组以等量生理盐水代替。实验中观察各组大鼠的精神状态、活动、进食等情况。标本处理与检验方法造模后72h，3%戊巴比妥钠溶液腹腔注射麻醉，开腹观察腹腔感染情况。以生理盐水6ml冲洗腹腔，收集冲洗液，3000rpm/min离心15min，取上清液。大鼠颈内静脉注射FITC荧光染色红细胞1ml，选择小肠系膜管径20-30nm的微静脉，利用BX50生物荧光显微镜、MedLab生物信号采集处理系统采录、分析微静脉流速。取下腔静脉血后处死动物，取空肠段约1cm。血液静置30min后以3000rpm/min离心10min，取血浆，-70℃保存。空肠组织以10%甲醛固定液固定。血浆及腹腔渗出液白蛋白测定采用溴甲酚紫法自动分析测定，血浆TNF-α测定采用放射免疫分析法。病理组织学检查取固定后的空肠标本，石蜡包埋切片，HE染色后用普通光学显微镜观察，并进行肠粘膜损伤病理评分［3］。0级：正常粘膜绒毛；1级：上皮下间隙扩大，血管充血；2级：上皮下间隙扩大明显，上皮与固有层分离；3级：粘膜上皮剥脱，部分绒毛尖端剥落；4级：绒毛剥落，固有层及扩张血管显露；5级：固有层分解，出血、溃疡。统计学处理采用SPSS统计软件包，数值变量用表示，采用Student-Newman-Keuls检验，分类变量采用Kru