大孔吸附树脂分离紫萍中总黄酮的工艺研究.docx

大孔吸附树脂分离紫萍中总黄酮的工艺研究【摘要】目的探讨大孔吸附树脂法纯化紫萍总黄酮的工艺。方法将AB-8，HPD-450和HPD-6003种大孔吸附树脂对紫萍总黄酮的吸附效果进行了比较，并对AB-8的吸附特性进行了研究。结果AB-8，HPD-450和HPD-600对紫萍总黄酮的吸附量分别为：，和mg/g，解吸率分别为%，%和%。AB-8纯化紫萍总黄酮的工艺条件为：上柱样品pH值为5～6，以1BV/h的速度流过树脂，待吸附平衡后，用4BV的蒸馏水以2BV/h的速度淋洗树脂，然后用70%的乙醇溶液以1BV/h的流速进行洗脱，收集第2～3BV时的洗脱液，其干燥品中的黄酮纯度可达80%左右。结论AB-8型大孔吸附树脂最适合于紫萍总黄酮的分离纯化。【关键词】大孔吸附树脂紫萍总黄酮)Abstract:ObjectiveTostudythetechologyforisolationofthetotalflavonoidsfromSpirodelapolyrrhiza(L.)absorptionquantityanddesorptionrateofthreekindsofmacroporousabsorptionresins(AB-8,HPD-450,HPD-600)werecompared,andtheisolationcharacteristicsofAB-8ontotalflavonoidswerestaticabsorptionquantitiesofthreemacroporousabsorptionresinswere,,/g,andthedesorptionratewere%，%and%.TheoptimizedconditionsofAB-8isolatingtotalflavonoidsweretoelutewith4BVwatersolutionby2BV/h,desorbwith4BV70%ethanolby1BV/handcollecttheethanolsolutionat2-3BVmostfittedfortheisolationoftotalflavonoidsinthreetestedresins.Keywords:Macroporousabsorptionresin；Totalflavonoids；Spirodelapolyrrhiza(L.)Schleid大孔吸附树脂是一类人工合成的、具有多孔网状结构和表面活性的高分子材料。同其它的吸附剂相比，大孔吸附树脂具有物理化学稳定性高、吸附选择性独特、再生简单、使用寿命长、溶剂消耗少、操作简便、安全等优点。目前，大孔吸附树脂已经广泛地应用在食品、化工、环保、医药工业和临床鉴定等领域。利用大孔吸附树脂进行分离和纯化中草药中的有效成分，已经越来越受到人们的重视。自20世纪90年代以来，大孔吸附树脂被用于黄酮类化合物、皂苷类、生物碱类等成分的分离［1］。本试验拟选用3种国产大孔吸附树脂，较为系统的对紫萍总黄酮的吸附量、解吸率及影响因素进行研究，以期为紫萍总黄酮的精制选择适宜的大孔吸附树脂，并为其工业化生产提供基本的工艺参数。1器材1材料上柱样品：紫萍全草购自沙坪大药房。用1∶10料液比的60%乙醇溶液于60℃下提取2h，重复2次，合并提取液，减压浓缩。浓缩液再用粘度为30Pas的壳聚糖溶液于60℃，pH的条件下絮凝除去浓缩液中的大部分蛋白质，过滤后得到上柱样品。大孔吸附树脂，AB-8型大孔吸附树脂购自南开化工厂；HPD-450型和HPD-600型大孔吸附树脂购自河北沧州宝恩化工有限公司。基本物理性质见表1。表1实验用吸附树脂的基本性质2仪器旋转蒸发器RE-52型；紫外可见分光光度计756MC型。3试剂无水乙醇、氢氧化钠、亚硝酸钠、硝酸铝等试剂均为分析纯。2方法大孔树脂对紫萍总黄酮吸附量的测定准确称取经预处理的干树脂各，置于具塞磨口三角瓶中，精确加入上柱样品20ml，密封后置于振荡培养箱(28℃，100次/min)中振荡24h。充分吸附后，过滤，测定滤液中总黄酮的浓度，按下面的公式计算对总黄酮的吸附量。Q=VW(式1)Q：吸附量；Co：上柱液初始黄酮浓度；Cr：滤液中黄酮浓度；V：加入上柱液体积；W：大孔吸附树脂质量紫萍总黄酮解吸率的测定将“”中过滤后得到的大孔树脂放入三角瓶中，加入50ml95%的乙醇溶液，密封后置于振荡培养箱(28℃，100次/min)中振荡24h，使总黄酮解吸附，过滤得滤液，测定滤液中总黄酮的含量，按照下面的公式计算总黄酮的解吸率。D=CVQW×100%D：解吸率；C：滤液中黄酮含量；V：所加乙醇的体积；Q：树脂吸附黄酮的量；W：大孔吸附树脂的质量大孔树脂对紫萍总黄酮的动态吸附实验称取一定质量的大孔吸附树脂湿法装柱，上柱样品总黄酮浓度为2mg/ml，上