均匀设计法优选枸杞提取工艺.docx

均匀设计法优选枸杞提取工艺【摘要】目的优选枸杞提取工艺。方法以枸杞水提液中多糖含量为指标，采用均匀设计法筛选最佳提取工艺。结果枸杞提取工艺最好参数条件为加水量12倍，浸泡时间20min，煎煮时间20min，水提液枸杞多糖含量为mg。结论实验结果可为枸杞提取工艺的确定提供依据。【关键词】枸杞；提取工艺；均匀设计Abstract：ObjectiveTooptimizetheextractiontechnologyofLyciumbarbarumL.MethodsSelectthecontentsofLyciumbarbarumL.polycosefromtheextractsolutionasthetarget,usetheuniformdesignmethodtooptimizetheextractiontechnology.ResultsTheoptimumextractiontechnologywerequantityofwater12times,soaktimewas20min,decoctiontimewas20min.ThecontentsofLyciumbarbarumL.polycosewasresultofthisexperimentcanprovidereferencetotheextractiontechnologyofLyciumbarbarumL.Keywords：LyciumbarbarumL.；Extractiontechnology；Uniformdesign枸杞为茄科植物宁夏枸杞LyciumbarbarumL.的干燥成熟果实，味甘、性平，具有滋补肝肾、益精明目的功效［1］，在国内保健食品中使用率居首位［2］，现代药理研究证明枸杞具有免疫调节、降血糖、降血脂、抗衰老、抗肿瘤等作用，其药理作用与所含枸杞多糖有关［3］。制剂中枸杞多糖含量与枸杞的提取工艺密切相关，因此选择适当的提取工艺对于提高制剂质量至为重要。文献报道的枸杞提取工艺筛选方法一般是3因素3水平的正交实验，本试验采用3因素9水平的均匀设计，以水提液的枸杞多糖含量为指标，以加水量、浸泡时间、煎煮时间为指标筛选枸杞最佳提取工艺。1仪器与材料仪器250ml烧杯、100ml容量瓶、10ml离心管、10ml具塞刻度试管、1ml移液管、5ml移液管、可调温电炉、十万分之一天平、UV2401PC紫外分光光度计、均匀设计处理软件UniformDesignVersion。试药枸杞药材购自石河子天方恒德医药公司，经石河子大学药学院中药系李鹏教授鉴定为茄科植物宁夏枸杞的果实。苯酚、浓硫酸均为分析纯。2方法与结果供试液的制备精密称取枸杞药材6g，称9份，按实验设计方案进行煎煮，煎两次，合并两次煎液，滤过，定容至100ml，精密量取ml，置10ml离心管内，加无水乙醇5ml，混匀，4000r/min离心10min,弃上清，沉淀加无水乙醇3ml，混匀，4000r/min离心10min,弃上清，将离心管内的多糖用水溶解，转移至25ml容量瓶定容，即得供试液。标准液的制备精密称取105℃干燥至恒重的无水葡萄糖标准品25mg用蒸馏水溶解后定容至250ml量瓶中，摇匀即得。最大吸收波长的确定准确吸取供试液和标准液各ml，分别加水至ml,各精密加入5%苯酚溶液ml摇匀，迅速精密加入浓硫酸ml，放置5min，置沸水浴加热15min取出，再置冰水中冷却15min。精密量取蒸馏水ml，自“各精密加入5%苯酚”起同法操作，作为空白对照，在紫外分光光度计上于400～800nm范围扫描，结果供试液与标准液在490nm均有最大吸收，所以选择490nm作为最大吸收波长。标准曲线的制备准确吸取标准溶液，，，，，，ml分别置具塞试管中，分别加水至mL，各精密加入5%苯酚溶液ml摇匀，迅速精密加入浓硫酸ml，放置5min，置沸水浴加热15min取出，再置冰水中冷却15min；精密量取蒸馏水ml，同法做空白对照，在490nm处测定吸光度，得吸光度和质量浓度得回归方程A=+4，R2=5。结果表明葡萄糖浓度在～5mg·ml-1范围内与吸光度呈良好线性关系。精密度实验精密量取样品液ml按“”项下方法操作，平行测定5次，RSD为%,结果表明该方法精密度良好。重复性实验取样品液5份，每份ml按“”项下方法操作，测定，RSD为%,结果表明该方法重现性良好。回收率实验精密吸取同一供试溶液ml，取9份，每3份分别精密加入葡萄糖标准液ml、ml、ml，按“”项下方法测定，计算回收率，平均回收率为%，RSD为%，表明该法回收率良好。均匀实验设计指标、因素、水平的确定选择水提液中枸杞多糖含量作为指标，以加水倍数、浸泡时间、煎煮时间作为考察因素，每个因素取9个水平，因素水平表见表1。实验安排及结果选用U9表安排试验，并按“