参归软肝胶囊对大鼠肝纤维化保护作用的实验研究.docx

参归软肝胶囊对大鼠肝纤维化保护作用的实验研究【摘要】目的观察参归软肝胶囊对猪血清所致大鼠免疫性肝损伤、肝纤维化模型的影响。方法复制猪血清所致大鼠免疫性肝损伤、肝纤维化模型，测定血清ALT，AST，Alb，TP，SA，Hyp，观察肝病理变化,判断SGR对猪血清所致的大鼠免疫性肝损伤、肝纤维化模型的影响。结果SGR组ALT，AST，SA和Hyp降低(P)，TP和Alb增加(P)，肝脏损伤和纤维化程度降低。结论SGR对猪血清所致大鼠免疫肝损伤、肝纤维化有保护作用。【关键词】参归软肝胶囊；肝纤维化；肝功能；动物模型Abstract：ObjectiveTostudytheeffectofShen-gui-rangancapsuleonthehepaticfibrosisinmodelofhepaticfibrosiswasinducedinratsandliverfunction,serumAST,ALT,Alb,TP,liverSAandHypwereexamined.Histopathologicalchangeswereexaminedbyopticalmicroscope.ResultsComparedwithmodelgroup,inSGRmiddleandhighgroups:Liverfunctionswasimproved,ALT,AST,SAandHypofLiverwerelowered.TPandAlbwereincreased;Thedegreeoffibrosiswasreduced.ConclusionSGRcapsulehasprotectiveeffectonhepaticfibrosisinrats.Keywords：SGRcapsule；Hepaticfibrosis；Liverfunction；Animalmodel目前，西药逆转肝纤维化缺乏成熟有效的治疗药物。研制高效、低毒抗肝纤维化的中药具有重要意义。参归软肝胶囊主要由黄芪、丹参、川芎、当归、白芍、郁金等中药组成，有健脾、益气、活血、舒肝等功效。本实验通过研究SGR对猪血清所致大鼠免疫性肝损伤、肝纤维化模型的影响，为其临床开发提供理论依据。1动物、药物与试剂Wistar大鼠，雄性，常规饲料喂养，饮水量不限。动物合格证号：医动字0001681，河南省实验动物中心提供。SGR批号040912，由河南科技大学附属医院制剂室提供。复方鳖甲软肝片批号040310，批准文号：国药准字Z19991011，内蒙古福瑞中蒙药科技股份有限公司提供。羟脯氨酸试剂盒批号050424及唾液酸试剂盒，批号050508，均由南京建成生物工程研究所提供；猪血清，批号050106，郑州佰安生物工程公司提供，-10℃保存备用。2方法肝纤维化模型复制［1］将70只180～200g的雄性动物随机分成6组，即正常对照组，模型组，阳性对照组，SGR高、中、低剂量组。除模型组、正常对照组各15只外，其余每组10只。除正常对照组每只注射NSml外，其余各组动物均注射猪血清ml，2次/周，共12周。第12周末，取正常对照组及模型组动物各5只进行眼内眦采血，检测ALT，AST，Alb，TP并取其肝脏，作病理组织检查，进行肝纤维化积分的评分，确认肝纤维化模型建立。第12周起，按上述分组，分别灌服相应受试药物，连续12周。于灌服受试药物第12周末，各组分别动物眼内眦采血，检测ALT，AST，Alb，TP，SA，Hyp，取肝脏相同部位进行病理学检查，肝纤维化积分的评分，比较用药前后各项指标。给药方法和测定指标在确认肝纤维化模型建立以后，按前述分组，分别灌服相应受试药物，ml·-1·d-1连续12周，ig。正常对照组与模型组%CMC-Na，ig；阳性对照组成药g·kg-1，ig；SGR低、中、高3剂量组，生药，，g·kg-1，ig。以上各组均按试剂盒测试方法学进行ALT，AST，Alb，TP，SA，Hyp测定。实验结束，取各组大鼠肝脏的相同部位，10%中性福尔马林溶液固定，切片，HE染色，光学纤维镜进行病理组织学观察。肝纤维化积分评分标准参考文献［2］进行积分。统计学处理实验数据以±s表示，并进行差异显着性检验。3结果纤维化模型的建立生化检查模型组ALT，AST高于正常对照组，Alb及TP低于正常组。见表1。表1猪血清诱导的大鼠肝脏纤维化模型的建立模型组与正常对照组相比较，；n=15肝病理组织检查模型组大鼠肝纤维化积分高于正常对照组，正常对照组动物肝小叶结构正常，肝索、中央静脉、汇管区结构正常，无纤维结缔组织增生，未发现异常。模型组动物肝小叶结构紊乱，肝细胞肿胀，分界不清，界线消失，中央静脉周围可见多个点状坏死，炎细胞浸润，小叶间有纤维结缔组织增生，纤维母细胞增多，可见假小叶形成。见表2。表明大鼠肝纤维化