枫香槲寄生抗肿瘤有效部位总皂苷的提取及含量测定研究.docx

枫香槲寄生抗肿瘤有效部位总皂苷的提取及含量测定研究【摘要】目的探讨枫香槲寄生抗肿瘤有效部位总皂苷的提取工艺条件及含量测定方法。方法采用正交实验法设计提取条件，以齐墩果酸为对照品，用紫外分光光度法测定总皂苷的含量，优化提取方案。结果回收率为%，RSD＝%。各因素对总皂苷提取的影响程度依次为：乙醇浓度提取次数提取时间乙醇倍量。结论提取的最佳工艺条件为5倍量60％乙醇回流提取两次，h/次，该方法稳定，准确，重现性好。【关键词】枫香槲寄生紫外可见分光光度法正交实验总皂苷Abstract:ObjectiveToestablishthemethodstoextractanddeterminetheantitumorsaponinsfromViscumliquidambaricolumoptimizedconditionforextractionwasdeterminedbyorthogonaldesign.UV-Spectrophotometrywasusedforthedetermination.ResultsTherecoveryratiowas%,RSD=%.Theorderoffactorstoaffectthetotalsaponinsextractionwasethanolconcentrationsolventqualityextractiontimeextractionoptimumextractionconditionsare5times60%ethanolreflux2times,hourpertime.Themethodsarestable,accurateandreliable.Keywords:ViscumliquidambaricolumHayata；Ultraviolet-visiblespectrophotometry；Orthogonaltest;Totalsaponins枫香槲寄生ViscumliquidambaricolumHayata.系桑寄生科槲寄生属植物，该属植物主要分布于台湾及南方的一些省区，寄生于枫香、油桐、柿树或壳斗科等多种植物上。本植物草药名“枫树寄生”，有祛风除湿、舒筋活络之功效［1］。全株入药，治风湿性关节疼痛、腰肌劳损,民间以寄生于枫香树上为佳［2］。据报道枫香槲寄生中含有三萜［3］，黄酮苷［4］。我们的前期研究从枫香槲寄生中获得2个色原酮化合物［5］、反式桂皮酸、齐墩果酸、白杨素、圣草酚以及新化合物枫香槲寄生苷［6］、芫花素、β-香树脂醇乙酸酯、古柯二醇等［7］。其中三萜及三萜皂苷类化合物是抗肿瘤的有效成分［7］，主要集中于正丁醇部位。目前萜类化合物研究为天然产物化学中最活跃的部分，从中发现了许多结构复杂的新化合物，其中不少显示多种生物活性［8］。基于此，为进一步深入研究该植物的化学成分及生物活性，本研究采用正交实验法，对影响枫香槲寄生醇提正丁醇萃取部位总皂苷提取效果的诸因素进行考察,选择最佳提取条件，运用比色法以齐墩果酸为对照品，对枫香槲寄生中正丁醇萃取部位总皂苷的含量进行了测定。1仪器与材料1仪器日本岛津UV-2201型紫外光谱仪测定；德国sartorius电子天平；恒温水浴锅(型号：HHS11-4S)。2材料齐墩果酸对照品；枫香槲寄生植物购于广州清平药材市场并经广东药学院罗集鹏教授鉴定为枫香槲寄生ViscumliquidambaricolumHayata；乙醇，正丁醇，甲醇，香兰素，浓硫酸均为分析纯，水为去离子水。2方法与结果对照品溶液的制备将齐墩果酸对照品干燥至恒重，精密称取对照品mg，置10ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度，吸取1ml置10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，配成浓度为mg/ml的对照品溶液，摇匀备用。齐墩果酸对照品的显色方法精密吸取1ml浓度mg/ml的对照品溶液于小试管中，水浴挥干溶剂，依次加入新配制的8%香兰素－乙醇溶液ml，72%硫酸5ml，摇匀，置90℃水浴加热10min，立即取出，置冰水浴中冷却15min。显色剂同法操作作为空白对照［9］。测定波长的选择取齐墩果酸供试品溶液于400～700nm内扫描，在540nm处有最大吸收，确定540nm为测定波长，测得的结果以齐墩果酸为基准计算总皂苷的含量。标准曲线的绘制精密吸取,,,,,,ml齐墩果酸对照品溶液于具塞试管中，水浴中挥干溶剂。按“”显色条件显色。于540nm测定吸光度值。得回归方程：结果表明，在60～150μg范围内,齐墩果酸显色后的吸光度值与加样量的线性关系良好。回归方程为A=9C+9，相关系数r=3(N=6)。见图1。稳定性实验精密吸取齐墩果酸对照品溶液ml于具塞试管中，沸水浴上挥干溶剂。按显色条件显色。记时测定，每隔20min测定吸光度值，共测120min。RSD=%。结果表明齐墩果酸在120