当归多糖对HBV转基因小鼠树突状细胞作用.docx

当归多糖对HBV转基因小鼠树突状细胞作用【摘要】目的研究当归多糖对HBV转基因小鼠免疫调节作用。方法采用1%当归多糖(ASP)腹腔注射，每周2次，2周后摘取小鼠脾脏制备淋巴细胞，MTT法观察ASP对淋巴细胞的毒性作用；经粒-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素-4培养转基因小鼠脾脏来源树突状细胞，ELISA法检测DC分泌IL-12以及刺激混合淋巴细胞反应T淋巴细胞分泌IL-10、IFN-γ的含量。结果ASP在0～625mg/L浓度对HBV转基因小鼠无毒性作用，并能显着促进HBV转基因小鼠DC分泌IL-12，在混合淋巴细胞反应中，能有效促进T淋巴细胞分泌IFN-γ并抑制IL-10的分泌，从而上调DC功能。结论当归多糖对HBV转基因小鼠树突状细胞功能具有上调作用，可能是当归多糖免疫调节机制之一，为当归多糖在慢性乙型肝炎临床应用提供了实验依据。【关键词】当归多糖；HBV转基因小鼠；树突状细胞；慢性乙型肝炎【Abstract】ObjectiveToobservetheeffectofAngelicasinensispolysaccharide(ASP)onthefunctionofdendriticcells(DCs)inHBVtransgenicmice.MethodsASPof1%concentrationwasgiventoHBVtransgenicmicebyabdominalinjectiontwiceaweek.After2weeks,spleenswereharvestedtomakelymphocytes.MTTmethodwasusedtodetectASP’scytotoxicity.Dendriticcellswereseparatedfromlymphocytesandincubatedwithgranulocyte-macrophagecolony-stimulatingfactorandinterleukin-4.PhenotypeofDCswereassayedbyflowcytometry(FCM),IL-12releasedbyDCsandIL-10andIFN-γproducedbyTcellsinmixedlymphocytereaction(MLR)weremeasuredbyELISA.ResultsASPwithintheconcentrationsof0-625mg/Ldidn’tshowcytotoxicitytolymphocytes,ASPcouldenhanceDCs’secretion,increaseIL-12levelinHBVtransgenicmice,increasethesecretionofIFN-γ,inhibitthesecretionofIL-10inMLR,thusup-regulatesDC’sfunction.ConclusionASPcouldup-regulatedendriticcellsfunctioninHBVtransgenicmicethatmightbeonemechanismthroughwhichpolysaccharideregulateimmunefunction.OurexperimentresultsprovidedexperimentalevidencefortheuseofASPinCHBclinic.【Keywords】Angelicasinensispolysaccharide(ASP);HBVtransgenicmice;dendriticcell;chronichepatitisB慢性乙型肝炎(chronichepatitisB,CHB)患者免疫功能低下，不能有效清除乙型肝炎病毒，机体对HBV呈现免疫耐受状态［1］。树突状细胞是已知人体内功能最强大的抗原提呈细胞，在机体抗感染免疫中发挥重要作用。近年研究表明，CHB患者DC功能处于抑制状态，如何解决DC功能的低下状态成为国内外研究的热点，多糖类中药如香菇多糖等已被公认具有较好的免疫调节作用并广泛用于CHB和肿瘤的辅助治疗［2］，鉴于多糖类中药良好的免疫调节作用，理论上推测其对DC应有一定的调节作用，但迄今为止有关多糖对DC功能影响的报道尚不多见，因此，开展多糖类中药对DC影响的研究不仅开拓了多糖类研究的新领域，也有望为解决DC功能抑制提供安全实用的新制剂。当归多糖(Angelicasinensispolysaccharide，ASP)是中药当归的提取物，研究证实ASP具有较好的免疫调节作用和抗肿瘤作用，笔者曾报道羧甲基茯苓多糖能上调DC功能［3］，但ASP对DC的影响如何，相关报道甚少，因此本研究中，笔者利用HBV转基因小鼠作为动物模型，经ASP腹腔注射处理后，观察AS