灰黄霉素超声波提取工艺研究.docx

灰黄霉素超声波提取工艺研究【摘要】目的探讨超声波提取灰黄霉素的优化工艺条件。方法用紫外分光光度法(UV)测定灰黄霉素的含量。以灰黄霉素的提取率为评价指标，在单一影响因素考察的基础上，采用正交实验确定超声波提取灰黄霉素的优化工艺条件。结果超声波提取灰黄霉素的优化工艺条件为：10倍量的丙酮为提取溶剂，功率300W，单次辐射时间3s，间歇时间5s，提取时间40min，灰黄霉素提取率为%。通过验证实验表明，本实验所得工艺条件为优化工艺条件。结论本实验所得工艺条件可行，具有一定的实际应用价值。【关键词】灰黄霉素超声提取正交实验StudyontheultrasonicextractionprocessofgriseofulvinABSTRACTObjectiveTostudytheoptimalextractionconditionsofgriseofulvinbyultrasonicextractionmethods.MethodsThecontentofgriseofulvininextractorisdeterminedbyUVspectrophotometryandthecontentofgriseofulvinusedasqualitycontrolcriteria.Utilizingorthogonaltesttogainanoptimumextractionconditions,basedontheresultofsinglefactoralgorithm.ResultThebestextractionconditionsareasfollows:theextractingsolventisacetone(10V/W),thepoweris300W,theextractiontimeis40min,andtheultrasonicradiationtimeis3satatime.Thevalidateexperimentindicatesthattheconditiongainedbyexperimentisanoptimumone.ConclusionTheultrasonicextractionprocessofgriseofulvinisfeasible,andcouldbeusedinroutineoperation.KEYWORDSGriseofulvin;Ultrasonicextraction;Orthogonalexperiment灰黄霉素(griseofulvin)是1939年从灰黄青霉(Penicilliumgriseofulvin)培养液中得到的一种含氯代谢产物，1958年开始用于临床。1960年中国医学科学院抗生素研究所从我国土壤中得到灰黄霉素的生产菌，并研究试制成功灰黄霉素［1］。灰黄霉素是非多烯类抗真菌抗生素，已广泛用于治疗皮肤及角质层的真菌感染。对红色发癣菌、断发癣菌、硫毛发癣菌、小孢子菌和絮状表皮菌等有抑制作用［1］。临床用于头癣、迭瓦癣、皮肤癣及手(足，甲)癣等体表真菌感染，特别对头癣的疗效显着，国内治愈率在90%以上［2］。灰黄霉素是存在于菌丝体内部的抗生素。目前工业上采用溶剂连续浸泡干菌体的提取方法，溶剂大多为丙酮［1，3，4］。考虑到常规提取所需时间较长，提取率较低，溶剂用量较大，本研究探讨采用超声波技术提取灰黄霉素的工艺，利用超声波的空化［5］作用、热效应、机械作用破坏菌体细胞壁，使溶剂易于渗透至细胞内，有效成分仪器U1810型紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器公司)，型电子天平(德国Sartorius公司)，JY922D超声波细胞粉碎机(宁波新芝生物科技股份有限公司)，HF超声波循环提取器(北京宏祥隆生物技术开发有限公司)。材料灰黄霉素菌体(赤峰制药集团生产，编号：NI88)，对照品(中华制药厂产品，纯度为%)，丙酮(天津市博迪化工有限公司)，95%乙醇(沈阳化学试剂厂)，氯仿(天津市博迪化工有限公司)，所用试剂均为分析纯。2实验方法标准曲线的制备精密称取灰黄霉素对照品25mg，25ml丙酮溶液定容，配制标准溶液(初始浓度/ml)。精密量取标准溶液2ml于25ml容量瓶，用95%乙醇定容。取丙酮2ml置于25ml容量瓶中，95%乙醇定容，作为空白溶液。紫外光谱200～400nm全波长扫描，在326nm处有最大吸收峰。精密量取、、、、和的标准溶液分别置于25ml容量瓶中，用95%乙醇定容。取丙酮、、、、和分别置于25ml容量瓶中，用95%乙醇溶液定容，作为空白对照。在326nm处测其吸光度A值，测定结果计算得回归方程A=+r=灰黄霉素含量测定称取灰黄霉素菌体(含水5%)置于250ml烧瓶中，加入丙酮50ml，磁力搅拌回流提取三次，每次1h。测得菌体中灰黄霉素含量为%。灰黄霉