浅论枳椇子总黄酮微波提取工艺.docx

浅论枳椇子总黄酮微波提取工艺摘要：目的：研究枳椇子总黄酮的微波提取工艺。方法：以总黄酮为指标，采用正交试验法筛选最佳工艺条件。结果：优化的最佳工艺条件为：微波功率300W、乙醇浓度50％、10倍量溶剂、辐射时间20min。结论：微波提取技术能够快速高效的提取枳椇子总黄酮。关键词：枳椇子黄酮微波提取枳椇子，为鼠李科植物枳椇的干燥成熟带肉质果柄的果实或种子，自古以来就是一味解酒良药，素有“千杯不醉枳椇子”之说。历代医书对其解酒的叙述各异，例如《新修本草》与《千金翼方》中为“以其木为屋，屋中酒则味薄”；《本草纲目》中为“枳椇消酒积”等。该药材在《中华人民共和国卫生部药品标准-中药材》中也有收载，功效为止渴除烦、清湿热，解酒毒，用于酒精中毒、烦渴呕逆、二便不利等症。目前的文献资料表明总黄酮可能是其有效部位，故本文以总黄酮含量为指标，考察了微波法提取枳椇子总黄酮的影响因素，为寻求其最佳微波提取工艺提供依据。1仪器与材料仪器BS-223S分析天平(Sartorius)，XH-100A微波萃取仪，FWZUV-2000紫外可见分光光度计(龙尼柯仪器有限公司)。材料枳椇子：购于宜春市，经鉴定为鼠李科植物枳椇的干燥种子；芦丁对照品；无水乙醇，亚硝酸钠，硝酸铝，氢氧化钠均为分析纯2方法与结果溶液的配制对照品溶液的制备精密称取干燥至恒重的芦丁对照品，置250ml量瓶中，加30%乙醇溶解，稀释至刻度，摇匀，即得。供试品溶液的制备精密量取样品溶液，置于25ml量瓶中，加入5%亚硝酸钠溶液。摇匀后放置6min，加10%硝酸铝溶液，摇匀，放置6min，加氢氧化钠试液5ml，加30%乙醇稀释至刻度，摇匀，显色l0min，即得。吸收波长的测定精密量取芦丁对照品溶液，按项下的方法显色后，在350nm～650nm进行波长扫描，结果见图1。可以看出，在500nm处有最大吸收，故选择500nm处测定波长。标准曲线的建立精密量取芦丁对照品溶液、、、、、分别置于25ml量瓶中，按项下方法显色，以相应试剂为空白，于500nm处测定吸光度。以浓度，芦丁浓度在20~70μg/ml之间时与吸光度有良好的线性关系。实验精密度、重现性实验RSD均小于%，符合方法学要求。回收率实验精密量取正交试验表中的5号样品溶液，置25ml量瓶中，分别精密加入对照品溶液，按项下方法显色并测定它们的吸光度，计算回收率，结果回收率在%～%之间，RSD小于3％，表明重现性好，方法可行。正交试验与结果提取工艺取枳椇子于烘箱中60℃干燥24h，粉碎，取20～40目粗颗粒10g置微波萃取仪配套的三口烧瓶中，加入溶剂，浸泡15min后放入微波萃取仪中，按正交表中的条件提取2次，滤过，合并滤液，残渣用适量溶剂洗涤3次，最后并入250ml量瓶中，定容。按照前述方法进行含量测定，结果见表2与表3。注：(2，2)＝，(2，2)＝结果与分析由表3直观分析可知：各因素作用主次为C＞A＞B＞D，且以A2B3C3D3为最佳，即功率为300W，乙醇浓度为50％，料液比为10，辐射时间为20min。方差分析中，由于D因素对提取影响极小，故将其列为误差列。从表3可以看出，C因素的改变对总黄酮的提取效率有非常显着性影响，A因素的改变对总黄酮的提取有显着性影响。结论与前面的直观分析相同。正交试验验证按照正交试验优化的工艺进行提取，测定总黄酮含量，结果2次验证的结果分别为％、％，优于正交试验表中的各次试验。3结论与讨论通过正交试验对枳椇子总黄酮的微波提取工艺进行了研究，结果表明最佳提取工艺为微波功率为300W，乙醇浓度为50％，料液比为10，辐射时间为20min。采用文献报道的回流法对枳椇子中总黄酮含量进行了测定，所测结果为％，与微波提取法所测结果接近，但耗时较长，故微波法在缩短提取时间、提高提取效率等方面具有较大优势。参考文献：国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草(精选本)[M].上海科学技术出版社，1996:1140.陈绍红.枳椇子解酒的文献整理和药效学研究[D].北京中医药大学，2003，23.中华人民共和国卫生部.卫生部颁药品标准(中药材第一册)[D]，1996，63.张洪，叶丽萍，张如洪，等.枳椇子有效部位的初步研究[J].广东药学院学报，2003，19(2):111.文为，张洪，曾嵘，等.枳椇子总黄酮提取工艺的优化[J].医药导报，2008，27(1):77.