标本久置对ELISA法检测乙型肝炎表面抗原结果的影响.docx

标本久置对ELISA法检测乙型肝炎表面抗原结果的影响【摘要】目的探讨标本久置对ELISA法检测乙肝表面抗原的影响。方法筛选强阳性、弱阳性及阴性标本若干份，用ELISA法对同一标本进行当天和隔日检测。结果强阳性及阴性标本放置前后，乙肝表面抗原检测结果相同，无明显差异，而弱阳性标本放置后，出现假阴性。结论标本久置会使乙肝表面抗原的免疫活性减弱，从而遗漏乙肝表面抗原弱阳性者。【关键词】ELISA；标本久置；乙型肝炎表面抗原【Abstract】ObjectiveInquiringintoeffectoflong-laidsamplesondetectingHBsAgwithELISA.MethodsClassifyingthesamples-strongpositivesamples,weakpositivesamplesandnegativedetectingthemrespectivelywithELISAatonceanddetectingthesamesamplesthenextday.ResultsTherearenoobviousdifferencesforstrongpositiveandnegativetheweakpositivesampleappearspseudo-negativeafterbeinglaid.ConclusionHBsAgimmuneactivitycanbeweakenedafterthesamplesarelaidlong,thendoctorsmayomitthepatientswithHBsAgweakpositiveillness.【Keywords】ELISA；long-laidsamples；HBsAg酶联免疫吸附试验是20世纪70年代发展起来的一种酶免疫测定技术。因其敏感、特异、操作简便、重复性好等优点，已在疾病诊断、科研等医学领域中得到广泛的应用。目前，各实验室多采用ELISA法检测乙肝表面抗原，其测定过程中受影响的因素较多［1］，主要有标本、试剂及操作等因素，本文旨在探讨标本久置对检测结果的影响。1材料与方法血清标本HBsAg强阳性血清标本45例，HBsAg弱阳性血清标本45例，均来自当天门诊及住院患者，30例健康者血清来自大学生自愿者。将每份已分离的血清均分成两份，一份当日测定，一份置于冰箱4℃保存，第2天取出平衡至室温待测。试剂及仪器ELISA法测定HBsAg试剂盒购自珠海丽珠试剂有限公司；ELM-3000酶标仪。研究方法参照《全国临床检验操作规程》ELISA双抗体夹心法，严格按照试剂盒说明书进行操作，用酶标仪单波长，空白孔校零后，测定各标本OD值。统计学处理采用SPSS统计软件分析，运用配对设计t检验。2结果30例HBsAg阴性标本和45例HBsAg强阳性标本，当天和隔日血清检测结果全部一致；45例HBsAg弱阳性标本，隔日检测出现2例假阴性，结果见表1。表1各组当天与隔日标本HBsAg的检测结果比较30例HBsAg阴性标本和45例HBsAg强阳性标本，当天和隔日血清OD值比较，差异无显着性。45例HBsAg弱阳性标本，当天和隔日血清OD值比较，差异有显着性。3讨论本组实验显示30例HBsAg阴性标本和45例HBsAg强阳性标本，当天和隔日血清检测结果全部一致，当天和隔日血清的HBsAg的OD值差异无显着性；45例HBsAg弱阳性标本，隔日血清检测出现假阴性率为%，当天和隔日血清的HBsAgOD值差异有显着性。本实验结果表明标本在冰箱中放置时间过长，可使抗原免疫活性减弱，致使OD值明显降低，导致假阴性出现。HBsAg是诊断和治疗乙型病毒性肝炎的一个重要的指标，在临床实验中，发现影响ELISA试验的因素很多［2］，由于标本放置过久而造成假阴性，不能及时对该病做出早期诊断，从而延误治疗时间，就会给患者带来不必要的痛苦。故在ELISA检测时，标本要做到及时检测，并且每一步操作都要严格按照说明书，严格控制影响因素，保证测定结果准确、可靠，出具一份有价值的检验报告单。【参考文献】1王叶芳，密辉，王霞.ELISA法检测乙肝表面抗原影响因素的探讨.淮海医药，2000，18：290.2李俊峰.造成HBsAg假阳性结果分析.山西预防医学，2002，11：318.