兔煤工尘肺模型HRCT表现与病理学对照研究.docx

兔煤工尘肺模型HRCT表现与病理学对照研究[摘要]目的复制兔煤尘肺模型、各期肺部HRCT表现、病理结果，分析其关系。方法40只兔随机分为5组，每组内任选5只为实验对象，煤尘悬液灌注，另3只方法同生理盐水对照。2周、1、2、3、5个月各组兔行CT扫描，各期兴趣区病理切片制作，观察改变。结果模型肺各期HRCT表现与病理结果一致，观察发现早期兔肺出现磨玻璃及实变影，病理证实主要是水肿、组织浸润引起的小叶间隔增厚和肺泡腔内渗出；中晚期间质纤维化并见微结节、支气管扩张，病理证实为增生纤维组织及煤结节；对照组无上述改变。结论兔煤尘肺模型成功，各期病理进程HRCT上可观察到。[关键词]动物模型；煤工尘肺；ＨＲＣＴ；病理[中图分类号]R816.4[文献标识码]B[文章编号]1673-9701（2012）12-0091-03煤尘肺是我国工业化发展进程中发病率较高[1-2]的职业病，发病机制至今尚未完全阐明,这对尘肺患者的治疗造成困难。本实验旨在通过复制无创性兔煤尘肺模型，记录不同时期兔肺的HRCT表现与病理结果，行对照，系统地观察此病在兔肺的演变过程，分析煤尘肺在兔肺的影像学特征及其病理基础，现报道如下。1实验材料1.1试验器材新生儿喉镜，片长70～90cm；导管直径0.3cm，长14cm[3，4]；导丝，10cm。1.2药物配置3％戊巴比妥钠[5]配制：精密称取3．00g戊巴比妥钠，溶于100mL蒸馏水得3％戊巴比妥钠溶液，用量1mL/kg。术中根据需要可适当加（０．２～０．５）ｍＬ/ｋｇ的剂量；青霉素针剂160万U/支，每只20万U/d。1.3动物选择雄性白兔40只，体重2～3kg，山西医科大学实验动物中心提供，造模前观察2周。1.4悬液制备将煤尘样品（东山煤矿提供，小于5μm的粉尘颗粒占95%以上，游离SiO2含量2方法2.1实验分组白兔40只随机分为五组，内分煤尘组和对照组，各期煤尘组5只，对照组3只，煤尘组兔气管内注入100mg/mＬ（灌注量2mＬ/kg）煤尘悬液，间隔１周，再次注入同剂量悬液；对照组注入同等剂量生理盐水。2.2模型制备将饲养观察2周的兔麻醉后固定于手术台上，插入新生儿喉镜，尽量向上提拉颈项,使镜片上压暴露声门，看清声带后,将穿入导丝的塑料气管导管经口从声门处插入,导管进入气管后动物出现轻度呛咳，拔出导丝，观察气流，以确定导管在气管内，并在导管末端迅速接上定量浓度（100mg/mＬ）粉尘的注射器,粉尘注入后,迅速拔出导管和喉镜,轻揉双肺片刻,使粉尘自然进入左、右支气管。为预防感染,造模前、后3d，每只兔注射青霉素20万U。2.3扫描方案16排螺旋CT（美国GElightspeed）行胸部扫描，螺距1.37:1，层厚2mm，骨算法重建[6]，所有图像均在GE工作站ADW（advantageworkstation）4.1上进行后处理。各期分别按上述扫描方案行CT检查，分析记录影像学表现和感兴趣区。2.4标本制作各期兔行CT扫描后，按照尘肺病理诊断标准GBZ25-2002[7]的要求，于处死后24h内行离体标本制作并将标本固定5d后切开检查。2.5病理检查与分析参照影像学结果，感兴趣区各期、各组兔右肺尖、心、膈叶及肺门水平各取一块组织（中间叶较小，略去不计）[8]，分组标记。脱水、石蜡包埋后，4μm的厚度连续切片，兴趣区分别行HE、MASSON染色，肺组织实质、间质病理学结果分析记录。2.6统计学处理数据的统计在SPSS13.0软件上分析，秩和检验用于分析各造模时间段影像学（表1）和病理表现（表2）的差异，分别得出H=10.508，P=0.033，H=13.640，P=0.009，各时间段差异有统计学意义；Spearman秩相关用于分析各时间段HRCT表现与病理进程，得出所有观察时间段HRCT表现与病理表现均有相关性，HRCT表现与病理进程呈正相关存在。2结果以每个肺叶的兴趣区为基本单位，依据Szapiel[12]方法确定病理进程的分级：Ⅰ级：无明显肺泡炎症或间质纤维化；Ⅱ级：肺泡炎症+间质纤维化面积小于20％；Ⅲ级：肺泡炎症+间质纤维化面积20％～50％；Ⅳ级：肺泡炎症+间质纤维化面积＞50％，肺泡结构紊乱。2.1正常组HRCT：兔肺纹理清晰，可见到支气管或血管形成的纹理影，走行自然（封三图1Ｃ图所示）。呼吸伪影存在，双下肺纹理稍乱，但本身光滑，无增粗，肺实质内密度均匀。病理表现：正常肺组织及肺泡结构，支气管上皮完好，黏膜光滑，各层结构清晰（封三图1Ａ图所示）。2.2尘肺组HRCT：2周、1个月见特征性纤维索条影，粗细不一，长度1～4cm，不规则状，以双上肺为著，并可见到毛玻璃样密度（封三图1Ｄ图横箭头所示）；２～３个月条片状的纤维条索影增多，较以前变细，局部毛玻璃样密度减低，纤维化病变收缩（封三图1D图竖箭头所示），牵拉